血管迷走神經(jīng)性暈厥β1腎上腺素受體基因Arg389Gly多態(tài)性及治療的研究.pdf

1、一、研究背景:
　　 血管迷走神經(jīng)性暈厥(VVS)亦稱血管抑制性暈厥,是由神經(jīng)反射誘發(fā)的暈厥伴有過(guò)度血管擴(kuò)張和/或心動(dòng)過(guò)緩。在暈厥病例中占相當(dāng)大的比例,發(fā)病率約占所有暈厥患者的44％,占不明原因暈厥的70％。發(fā)作時(shí)以血壓下降為其特點(diǎn),有或不伴有心動(dòng)過(guò)緩和自主神經(jīng)興奮的表現(xiàn),如蒼白、惡心、頭暈、黑曚等。血管迷走神經(jīng)性暈厥的診斷基于病史,確診于直立傾斜試驗(yàn)(HUTT)。根據(jù)直立傾斜試驗(yàn)中血流動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)將血管迷走神經(jīng)性暈厥分為3型,1

2、型:混合型,2型:心臟抑制型,3型:血管抑制型。其預(yù)后良好,但常常反復(fù)發(fā)作,影響工作和生活,甚至導(dǎo)致嚴(yán)重意外發(fā)生,如跌倒、頭顱外傷等,可能是不明原因跌倒的主要因素。盡管有很多相關(guān)性的研究,但是對(duì)它病因的了解仍然十分有限。近年來(lái)人們?cè)噲D從遺傳學(xué)角度探討其病因。已知β1腎上腺素受體興奮劑異丙腎上腺素可以誘發(fā)血管迷走神經(jīng)性暈厥,故可以推測(cè)β1腎上腺素受體與此有關(guān)。β1腎上腺素能受體(β1 adrenergic receptor,β1-AR)是

3、心臟的主要β—AR,在介導(dǎo)心臟交感神經(jīng)-腎上腺系統(tǒng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮著重要的作用。β1-AR基因有兩個(gè)最重要的 SNP:核苷酸145A→G和1165C→G,相應(yīng)的氨基酸置換分別為49位Ser→Gly,389位 Arg→Gly。其中 Arg389Gly(C1165G)SNP位于細(xì)胞內(nèi)胞漿尾端近第七跨膜區(qū),此處被認(rèn)為是受體與 Gs蛋白偶聯(lián)的重要區(qū)域。體外突變研究表明 Arg389受體與Gly389受體相比具有更高的基礎(chǔ)腺苷酸環(huán)化酶活性和異丙腎上

4、腺素激動(dòng)的腺苷酸環(huán)化酶活性,提示β1-AR基因Arg389Gly(C1165G)位點(diǎn)SNP在血管迷走神經(jīng)性暈厥的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中可能具有重要的生物學(xué)意義。目前對(duì)β1-AR基因 Arg389Gly(C1165G)位點(diǎn)SNP與血管迷走神經(jīng)性暈厥的相關(guān)性的研究尚存在爭(zhēng)議,且該基因分布存在種族差異。本研究采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(Polymerase chain reaction-restriction fragmentlengt

5、h polymorphism,PCR-RFLP)技術(shù)進(jìn)行病例對(duì)照研究,旨在探討國(guó)人β1-AR基因 Arg389Gly(C1165G)位點(diǎn)SNP與血管迷走神經(jīng)性暈厥發(fā)生發(fā)展中的關(guān)系,期望在分子基因?qū)W水平闡明血管迷走神經(jīng)性暈厥發(fā)生發(fā)展的可能機(jī)制或特點(diǎn),為臨床防治提供基礎(chǔ)依據(jù)。
　　 血管迷走神經(jīng)性暈厥的治療方法有宣傳教育、藥物治療和起搏治療,尚無(wú)有效的治療方法。起搏治療給患者提供心臟起搏而起到抗暈厥效果,但其適應(yīng)癥主要為伴有心臟抑制

6、型的血管迷走神經(jīng)性暈厥患者,并不是大部分血管迷走神經(jīng)性暈厥患者能采取的治療方法。所以主要采取的治療方法在藥物方面,以β1受體阻滯劑為主,但療效不肯定。目前國(guó)外許多學(xué)者提出傾斜訓(xùn)練是治療血管迷走神經(jīng)性暈厥的有效方法。因此本文采用傾斜訓(xùn)練方法,并與藥物治療(美托洛爾)及對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比觀察治療血管迷走神經(jīng)性暈厥患者情況,來(lái)探討傾斜訓(xùn)練是否為血管迷走神經(jīng)性暈厥更好的有效的治療方法。
　　 二、研究目的:
　　 1、血管迷走神經(jīng)性

7、暈厥患者的β1-AR Arg389Gly基因多態(tài)性檢測(cè)。
　　 2、觀察傾斜訓(xùn)練防治血管迷走神經(jīng)性暈厥發(fā)生的情況。
　　 三、研究對(duì)象和方法:
　　 1、收集南方醫(yī)院心血管內(nèi)科90例不明原因暈厥患者,經(jīng)詳細(xì)詢問(wèn)病史、體格檢查、常規(guī)心電圖、血液生化、動(dòng)態(tài)心電圖、超聲心動(dòng)圖、頭頸部血管多普勒、電生理檢查排除病態(tài)竇房結(jié)綜合征、房室傳導(dǎo)阻滯、直立性低血壓、房顫等心、腦、神經(jīng)、代謝等疾病引起的暈厥,無(wú)服用過(guò)影響血流動(dòng)力學(xué)及

8、影響自主神經(jīng)功能的藥物史。對(duì)其行直立傾斜試驗(yàn),并對(duì)基礎(chǔ)直立傾斜試驗(yàn)陰性患者行舌下含服硝酸甘油0.5mg誘發(fā)。
　　 2、根據(jù)直立傾斜試驗(yàn)結(jié)果分組:A組、直立傾斜試驗(yàn)陽(yáng)性患者66例,為A1組基礎(chǔ)直立傾斜試驗(yàn)陽(yáng)性患者22例和A2組硝酸甘油激發(fā)后直立傾斜試驗(yàn)陽(yáng)性患者44例組成；B組、直立傾斜試驗(yàn)陰性患者24例。抽取這90例不明原因暈厥患者靜脈血,用酚-氯仿法抽提基因組 DNA,設(shè)計(jì)引物,采用聚合酶鏈反應(yīng)并對(duì)β1—AR基因SNP酶切位點(diǎn)

9、Arg389Gly(C1165G)進(jìn)行限制性酶切,分別比較β1-AR基因 Arg389Gly(C1165G)位點(diǎn)基因型及等位基因在各組人群中的分布特點(diǎn)。
　　 3、對(duì)直立傾斜試驗(yàn)陽(yáng)性患者隨機(jī)分為傾斜訓(xùn)練組(22例)、藥物治療組(22例)和對(duì)照組(22例)。傾斜訓(xùn)練組進(jìn)行傾斜訓(xùn)練,藥物治療組口服藥物美托洛爾25mg2次/d治療,對(duì)照組不予任何處理。3組患者均接受暈厥的宣傳教育并于2周后再次接受直立傾斜試驗(yàn),隨訪半年。分析3組患者治

10、療2周后直立傾斜試驗(yàn)的轉(zhuǎn)陰率及隨訪期間的暈厥復(fù)發(fā)率。
　　 4、結(jié)果分析及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)表示。對(duì)基因型頻率與等位基因頻率進(jìn)行檢驗(yàn)采用Hardy-Weinberg平衡律檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料組間比較采用X2檢驗(yàn)。計(jì)量資料的組間比較經(jīng)方差齊性檢驗(yàn),多樣本均數(shù)比較方差齊性者采用One-Way ANOVA,兩樣本間均數(shù)比較方差齊者采用獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn),方差不齊者采用t’檢驗(yàn)

11、。用單變量logistic回歸分析探討基因多態(tài)性與血管迷走神經(jīng)性暈厥發(fā)生的關(guān)系,計(jì)算優(yōu)勢(shì)比(odds ratio,OR)及95％可信區(qū)間(95％ confidence interval,95％CI)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 四、結(jié)果:
　　 1、患者性別、年齡、基礎(chǔ)心率及基礎(chǔ)血壓等基本資料在直立傾斜試驗(yàn)陽(yáng)性和直立傾斜試驗(yàn)陰性問(wèn)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在基礎(chǔ)直立傾斜試驗(yàn)陽(yáng)性、硝酸甘油激發(fā)后直立傾斜試驗(yàn)陽(yáng)性、

12、直立傾斜試驗(yàn)陰性三組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。直立傾斜試驗(yàn)陽(yáng)性患者基本資料在傾斜訓(xùn)練治療組、藥物治療組和對(duì)照組三組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、90例不明原因暈厥患者β1-AR Arg389Gly基因多態(tài)性比較:所有基因型和等位基因頻率符合Hardy-Weinberg平衡。HUTT陽(yáng)性組Arg389Arg基因型占37.8％(25例),Arg389Gly基因型45.5％(30例),Gly389Gly基因型16.7％(11例),

13、其中Arg389等位基因60.6％(80),Gly389等位基因39.4％(52)。HUTT陰性組Arg389Arg基因型83.3％(20例)、Arg389Gly基因型16.7％(4例),未發(fā)現(xiàn)Gly389Gly基因型,其中Arg389等位基因占91.7％(44),Gly389等位基因占8.3％(4)。HUTT陽(yáng)性組Gly389等位基因頻率高于HUTT陰性組(39.4％vs8.3％,X2=15.845 P<0.001)。
　　

14、3、基礎(chǔ)HUTT陽(yáng)性組Arg389Arg基因型占18.2％(4例),Arg389Gly基因型50％(11例),Gly389Gly基因型31.8％(7例),其中Arg389等位基因43.2％(19),Gly389等位基因56.8％(25)。硝酸甘油激發(fā)后HUTT陽(yáng)性組Arg389Arg基因型47.7％(21例)、Arg389Gly基因型43.2％(19例),Gly389Gly基因型9.1％(4例),其中Arg389等位基因占69.3％(6

15、1),Gly389等位基因占30.7％(27)?；A(chǔ)HUTT陽(yáng)性組Gly389等位基因頻率分布高于硝酸甘油激發(fā)后HUTT陽(yáng)性組(56.8％ vs30.7％,X2=8.393,P=0.004)。基礎(chǔ)HUTT陽(yáng)性組、硝酸甘油激發(fā)后HUTT陽(yáng)性組、HUTT陰性組患者中Gly389等位基因頻率逐漸下降,分別為:56.8％、31.7％、8.3％(X2=25.195,P<0.001)。
　　 4、單變量logistic回歸分析β1-AR基因

16、Arg389Gly位點(diǎn)基因Gly389等位基因?qū)ρ苊宰呱窠?jīng)性暈厥的相對(duì)危險(xiǎn)度,相對(duì)Arg389等位基因而言,OR值(95％CI)為7.150(2.425～21.085),P<0.001。
　　 5、直立傾斜試驗(yàn)陽(yáng)性患者治療兩周后:藥物治療組有2例患者口服美托洛爾后出現(xiàn)嚴(yán)重心動(dòng)過(guò)緩,心率最低達(dá)42次/分,伴血壓下降,胸悶、頭暈等不適要求停藥而退出試驗(yàn)。傾斜訓(xùn)練組和對(duì)照組均未出現(xiàn)不良反應(yīng)。傾斜訓(xùn)練組患者再次行直立傾斜試驗(yàn)時(shí),有19

17、例患者為陰性,轉(zhuǎn)陰率為86.4％。而藥物治療組為5例,轉(zhuǎn)陰率為25.0％。對(duì)照組4例,轉(zhuǎn)陰率為8.2％。傾斜訓(xùn)練組與其他兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),藥物治療組與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.591)。治療隨訪半年:傾斜訓(xùn)練組有2例患者僅堅(jiān)持了2個(gè)月的傾斜訓(xùn)練,但試驗(yàn)終止時(shí)未出現(xiàn)暈厥復(fù)發(fā)。傾斜訓(xùn)練組暈厥復(fù)發(fā)率為9.1％,藥物治療組、對(duì)照組暈厥復(fù)發(fā)率分別為40.0％、77.3％。3組比較,傾斜訓(xùn)練組暈厥復(fù)發(fā)率低于對(duì)照組(P<

18、0.05),及藥物治療組(P<0.05)；藥物治療組低于對(duì)照組(P<0.05)。
　　 五、結(jié)論：
　　 1、β1-AR基因Arg389Gly多態(tài)性與血管迷走神經(jīng)性暈厥HUTT陽(yáng)性結(jié)果相關(guān):Gly389等位基因可能是血管迷走神經(jīng)性暈厥的易患基因,而攜帶此等位基因的基因型以Arg389Gly為主。
　　 2、Gly389等位基因的分布可能與誘發(fā)暈厥的容易程度相關(guān):更易導(dǎo)致患者在應(yīng)對(duì)體位性直立傾斜挑戰(zhàn)時(shí)發(fā)生暈厥。