補(bǔ)腎化痰祛瘀中藥對多囊卵巢綜合征模型大鼠治療作用及機(jī)制研究.pdf

1、多囊卵巢綜合征(PCOS)是生育年齡婦女常見的一種極為復(fù)雜的內(nèi)分泌及糖代謝異常所致的綜合征，以雄激素過多及長期無排卵、肥胖、多毛、月經(jīng)失調(diào)、不孕為特征。發(fā)病率在育齡婦女中約占5-10％，占不排卵性不孕癥的50-70％。由于其生化特征、臨床表現(xiàn)及發(fā)病機(jī)理的異質(zhì)性而成為婦科內(nèi)分泌領(lǐng)域最復(fù)雜的研究熱點(diǎn)。臨床流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，PCOS病人發(fā)生II型糖尿病、高血壓、心臟病、高脂血癥、子宮內(nèi)膜癌，以及妊娠高血壓綜合征和妊娠糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)較正常人明顯增

2、加。因此，糾正因雄激素過多引起的肥胖、多毛、痤瘡、月經(jīng)失調(diào)、不孕等癥狀，預(yù)防各種近期及遠(yuǎn)期并發(fā)癥，對于保護(hù)婦女的生命健康及提高其生活質(zhì)量至關(guān)重要。 中醫(yī)學(xué)認(rèn)為腎藏精，主生殖，因此本病的發(fā)生多以腎的功能失調(diào)為本，以痰濁、瘀血阻滯為標(biāo)，治療上以牢補(bǔ)腎調(diào)整臟腑功能為主，標(biāo)實(shí)者在治本的基礎(chǔ)上，或化痰或祛瘀。因此，擬定了補(bǔ)腎化痰祛瘀的中藥復(fù)方，以Poresky法誘導(dǎo)多囊卵巢綜合征動(dòng)物模型，探索其對生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)及糖代謝的影響，以及對瘦素水

3、平、脂聯(lián)素mRNA表達(dá)的影響，研究復(fù)方中藥的藥效及其可能的作用機(jī)制。 第一部分、Pores ky法誘導(dǎo)多囊卵巢綜合征動(dòng)物模型預(yù)試驗(yàn)預(yù)實(shí)驗(yàn)。用Poresky法誘導(dǎo)多囊卵巢綜合征動(dòng)物模型，觀察中藥復(fù)方干預(yù)對造模后大鼠一般情況、體重、陰道細(xì)胞涂片的影響，同時(shí)研究血清性激素及空腹血糖和空腹胰島素的變化。 結(jié)果表明：用Poresky法誘導(dǎo)成功地制作出中醫(yī)腎虛痰瘀的PC0s動(dòng)物模型。大鼠體重以模型組增加最為顯著，中藥組與模型組相比，

4、P<0.05，差異有顯著性。血清激素水平比較：大鼠T及LH水平，以模型組最高，中藥組次之。中藥組與模型組比較，P<0.05，有顯著差異。LH/FsH比值以模型組最高，中藥組與模型組相比，P>0.05，差異無顯著性，但較模型組均呈明顯下降趨勢。大鼠FBG水平，以模型組為最高，中藥組與模型組比較，P>0.05，差異無顯著性，但數(shù)值較模型組降低；大鼠FINS水平，以模型組為最高，中藥組與模型組比較，P<0.01，有極顯著差異。大鼠陰道細(xì)胞涂片

5、變化模型組大多數(shù)無排卵，中藥組部分有排卵。 以上說明中藥補(bǔ)腎化痰祛瘀治療可以減輕或改善多囊卵巢的程度。 第二部分、復(fù)方中藥對PCOS模型大鼠血清性激素的影響。本實(shí)驗(yàn)采用Poresky法進(jìn)行造模，并分別以中藥、西藥(羅格列酮)、中西藥聯(lián)合用藥治療，觀察治療后大鼠一般情況，并評(píng)價(jià)對血清性激素T、FSH、LH的影響。 實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果證實(shí)，中藥組、羅格列酮組、聯(lián)合用藥組均可降低血清睪酮水平、LH水平、LH/FSH比值，而三

6、者之中，以聯(lián)合用藥組降低血清睪酮的療效最好，且優(yōu)于羅格列酮組；血清LH水平以聯(lián)合用藥組下降最為明顯；同時(shí)，聯(lián)合用藥組也能顯著改善LH/FSH比值情況。 第三部分、PCOS模型大鼠卵巢組織形態(tài)學(xué)的觀察。為評(píng)價(jià)模型的成功及藥物治療后的效果，進(jìn)一步觀察了各組大鼠HE染色的卵巢組織病理改變，通過觀察卵巢大體解剖及卵泡形態(tài)的改變，以對PCOS大鼠模型有一個(gè)客觀的評(píng)價(jià)，同時(shí)觀察藥物治療后卵巢組織病理形態(tài)的改變。 研究證明：復(fù)方中藥治

7、療后卵巢重量與模型組相比P<0.01，有極顯著差異；卵巢平均面積與模型組相比P<0.0 5，有顯著差異。說明復(fù)方中藥治療后卵巢重量及卵巢平均面積均有明顯下降。 病理切片是衡量卵巢形態(tài)學(xué)變化的客觀指標(biāo)，復(fù)方中藥治療后病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)PC0S大鼠卵巢僅見少許囊性竇卵泡的出現(xiàn)，竇腔不大，卵泡壁顆粒細(xì)胞層及黃體數(shù)量較模型組明顯增加，均證實(shí)了中藥治療后PcO的改善和排卵功能的恢復(fù)。 第四部分、復(fù)方中藥對PCOS模型大鼠糖代謝的影

8、響。本實(shí)驗(yàn)采用Poresky法進(jìn)行造模，并分別以中藥、西藥(羅格列酮)、中西藥聯(lián)合用藥治療，觀察治療后大鼠體重、血糖的變化，并評(píng)價(jià)對血清INS、IGF-1的影響，從而來探討復(fù)方中藥對PCOS模型大鼠糖代謝的影響。 結(jié)果顯示：中藥組、聯(lián)合有藥組均能有效降低PCOS大鼠體重，且聯(lián)合用藥組優(yōu)于羅格列酮組。模型組的空腹胰島素水平、空腹血糖水平、胰島素抵抗指數(shù)(Homa-IR)均明顯高于正常組，說明PCOS大鼠胰島素抵抗的模型是基本成功的

9、。治療后各組均能降低血清INS水平，但聯(lián)合用藥組降低血清INS的作用要優(yōu)于純中藥組；治療后聯(lián)合用藥組及羅格列酮能有效降低FBG水平，而中藥組降低FBG的作用不明顯。胰島素抵抗指數(shù)(Homa-IR)治療后各組均有所下降，但聯(lián)合用藥組及羅格列酮的作用要優(yōu)于純中藥組，尤其以聯(lián)合用藥組最好。對于血糖曲線下面積比較，以模型組最高，其余各組治療后均有所下降，其中以聯(lián)合用藥組下降最明顯。模型組血清IGF-Ⅰ水平明顯高于對照組。三種治療均能降低血清IG

10、F-Ⅰ水平，其中，聯(lián)合用藥組降低IGF-1的效果較之純中藥組為佳。 第五部分、PCOS模型大鼠血清Leptin水平及相關(guān)因素的分析。本實(shí)驗(yàn)采用Poresky法進(jìn)行造模，并分別以中藥、西藥(羅格列酮)、中西藥聯(lián)合用藥治療，觀察治療后大鼠血清Leptin水平的變化，并對大鼠Leptin水平與相關(guān)因素(FSH、LH、LH/FSH、T、IGF-1、INS、WEIGHT)的分析，從而來探討復(fù)方中藥對PCOS模型大鼠的影響及可能的作用機(jī)制。

11、 研究發(fā)現(xiàn)：各組Leptin水平的比較，以模型組最高，其余各組均降低。正常組與模型組相比，P<0.05，有顯著差異，模型組血清Leptin水平顯著高于正常組，這與以前的大多數(shù)研究結(jié)果相似。治療后羅格列酮組及聯(lián)合用藥組均能明顯降低Leptin水平，中藥組雖作用不明顯，但在數(shù)值上也明顯低于模型組，可能隨著樣本例數(shù)的增加，中藥的作用有待進(jìn)一步證實(shí)。 對大鼠Leptin血清與FSH、LH、LH/FSH、T、IGF-1、INS、W

12、EIGHT的分析發(fā)現(xiàn)，大鼠Leptin血清與LH、T、IGF-1、INS呈正相關(guān)，與其他指標(biāo)無明顯相關(guān)性。提示血清Leptin水平隨LH、T、IGF-1、INS增加而增高。 第六部分、PCOS模型大鼠血清APN測定及脂肪組織APN-mRNA表達(dá)的研究。本實(shí)驗(yàn)采用Poresky法進(jìn)行造模，并分別以中藥、西藥(羅格列酮)、中西藥聯(lián)合用藥治療，用ELISA方法測定治療后大鼠血清APN水平的變化，并通對大鼠脂肪組織APN-mRNA表達(dá)的

13、研究，從而來探討復(fù)方中藥對PCOS模型大鼠的影響及可能的作用機(jī)制。 研究發(fā)現(xiàn)：各組血清Adiponectin水平的比較，以模型組最低，其余各組均升高。正常組及聯(lián)合用藥組與模型組相比P<0.01，有非常顯著差異。中藥組及羅格列酮組與模型組比較P<0.05，有顯著差異。中藥組及羅格列酮組與聯(lián)合用藥組比較，均P<0.05，差異有顯著性；中藥組與羅格列酮組比較，P>0.05，差異無顯著性。說明三種方法均能升高血清Adiponectin水

14、平，但聯(lián)合用藥組較中藥組及羅格列酮組為佳。 各組脂肪組織Adiponectin-mRNA相對表達(dá)含量的比較，以模型組最低，其余各組均升高。其中正常組與模型組相比P<0.01，有非常顯著差異。聯(lián)合用藥組及羅格列酮組與模型組比較，P<0.01，有極顯著差異。中藥組與模型組比較，P<0.05，有顯著差異。中藥組及羅格列酮組、聯(lián)合用藥組三組比較，均P>0.05，差異無顯著性。說明三種方法均能上調(diào)脂肪組織Adiponectin的表達(dá)，且彼