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文檔簡介
1、目的:
觀察運動干預(yù)對大鼠多囊卵巢綜合征的影響,研究瘦素(leptin)及其長型受體(OB-Rb)以及細胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制物3(SOCS3)在干預(yù)前后的變化,揭示運動預(yù)防大鼠PCOS的作用機制,為明確PCOS的發(fā)病機制、預(yù)防和控制PCOS提供科學(xué)依據(jù)。
方法:
本實驗采取完全隨機設(shè)計(completely random design),設(shè)置對照組、模型組和干預(yù)組進行實驗,其中干預(yù)組采取運動的干預(yù)方式,分為高
2、(2h/d)、中(1h/d)、低(0.5h/d)三個運動強度。放射免疫法測大鼠血清性激素、空腹胰島素、瘦素水平;HE染色觀察卵巢組織學(xué)變化;實時熒光定量PCR法檢測大鼠卵巢組織中l(wèi)eptin、OB-Rb以及SOCS3 mRNA水平;蛋白免疫印跡法檢測卵巢中OB-Rb及SOCS3蛋白水平;免疫組化法檢測OB-Rb、SOCS3蛋白在卵巢中的表達部位和強度。
結(jié)果:
大鼠一般情況
模型組大鼠PCOS構(gòu)建成功,表現(xiàn)
3、為肥胖、瘦素抵抗、性激素紊亂、無排卵和卵巢內(nèi)大量囊狀卵泡;空腹胰島素(FINS)、瘦素(leptin)水平升高。
0.5h干預(yù)組大鼠體重、血清性激素、瘦素水平均與模型組無統(tǒng)計學(xué)差別(P>0.05);動情周期類似,卵巢內(nèi)含大量囊狀卵泡,罕見正常卵泡和黃體;空腹胰島素水平小幅下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
1h/d的運動干預(yù)減輕了大鼠的體重,使之與對照組無統(tǒng)計學(xué)差別(P>0.05),并幫助大鼠恢復(fù)排卵功能;卵巢
4、內(nèi)可見正常卵泡和黃體,伴囊狀卵泡;孕酮(P)水平較模型組顯著上升但仍低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);卵泡刺激素(FSH)水平顯著上升,F(xiàn)INS、leptin水平大幅降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),均與對照組水平無統(tǒng)計學(xué)差別(P>0.05)。
除雌二醇(E2)濃度低于對照組水平之外,2h干預(yù)組大鼠在體重、動情周期、卵巢形態(tài)學(xué)方面均有良好表現(xiàn):2h/d的運動降低了PCOS大鼠睪酮(T)、黃體生成素(LH)、F
5、INS、leptin水平,也提升了P和FSH水平,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
卵巢組織中l(wèi)eptin、OB-Rb以及SOCS3基因的轉(zhuǎn)錄水平
模型組大鼠卵巢leptin和SOCS3 mRNA高于對照水平,OB-Rb mRNA水平低于對照,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。0.5h干預(yù)組大鼠卵巢中l(wèi)eptin mRNA沒有發(fā)生變化,與模型組無統(tǒng)計學(xué)差別(P>0.05),但OB-Rb mRNA升高,SOCS3
6、mRNA降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。1h干預(yù)組大鼠卵巢中l(wèi)eptin mRNA低于0.5h組水平,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);OB-Rb mRNA和SOCS3 mRNA均與0.5h組水平無差別(P>0.05)。2h組大鼠卵巢leptin mRNA水平與對照組無統(tǒng)計學(xué)差別(P>0.05);OB-Rb mRNA、SOCS3 mRNA水平均高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
卵巢組織中OB-Rb、SO
7、CS3基因的翻譯水平和表達部位
OB-Rb在各階段發(fā)育卵泡的顆粒細胞以及卵母細胞中均有表達。隨著卵泡的發(fā)育,卵泡的顆粒細胞和卵母細胞中OB-Rb表達呈逐漸增強的趨勢。模型組和0.5h干預(yù)組
各發(fā)育卵泡顆粒細胞和卵母細胞中 OB-Rb表達量均顯著低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。1h和2h的運動干預(yù)促進了卵泡和卵母細胞中OB-Rb的表達,顯著高于模型組(P<0.05)。三個干預(yù)組囊狀卵泡顆粒細胞中OB-Rb
8、表達量在組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),均高于模型組水平(P<0.05)。
SOCS3與OB-Rb的表達部位一致。在顆粒細胞中,發(fā)育卵泡中SOCS3的表達量與OB-Rb呈現(xiàn)相反趨勢;而在卵母細胞中則無明顯差別。0.5h和1h干預(yù)組各發(fā)育卵泡中SOCS3的表達量均低于模型組但高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而2h干預(yù)組出現(xiàn)異常增高,這很可能與2h運動干預(yù)顯著促進OB-Rb在卵巢中的表達有關(guān)。
結(jié)論:
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