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文檔簡介
1、本文通過實驗室模擬碰傷,以綠豆芽為材料,研究離心傷害對細(xì)胞的生理及抗病性的影響。首先,對離心處理的綠豆芽進(jìn)行臺盼藍(lán)、中性紅、番紅、固綠和苯胺蘭染色,觀察離心傷害對細(xì)胞膜、液泡、細(xì)胞壁及細(xì)胞核的影響,試圖尋找引起傷殘細(xì)胞的離心力,并判斷細(xì)胞壞死是否由細(xì)胞膜滲漏引起。其次,測定離心傷害的綠豆芽的生長勢和腐爛率及與膜脂過氧化、活性氧、保護(hù)酶、酶促褐變有關(guān)的生理指標(biāo)的動態(tài)變化,以研究離心傷害對綠豆芽生理生化的影響。最后,對離心傷害的綠豆芽接種青
2、霉菌,檢測生長勢和腐爛率,以評價其系統(tǒng)抗病能力;測定水楊酸(SA)、木質(zhì)素的含量變化及苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性,以評價其基礎(chǔ)抗病能力;分離純化自身的致病菌結(jié)合牛津杯抑菌實驗,以評價其組織產(chǎn)生新細(xì)胞的能力和特異性抗病能力;通過茉莉酸甲酯、殼聚糖、水楊酸、Vc及卵磷脂處理離心傷害(RCF=376×g及RCF=845×g)的綠豆芽并接種青霉菌,試圖提高對綠豆芽的保護(hù)能力。
主要研究結(jié)果如下:
(1)染色結(jié)果表
3、明:綠豆芽組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常,只是滲漏,細(xì)胞在3381×g時可能破裂,且在RCF=94×g~376×g之間出現(xiàn)傷殘細(xì)胞。
(2)生理指標(biāo)測定結(jié)果表明:94×g下的細(xì)胞基本保持了膜的完整性,376×g以上的細(xì)胞膜受到傷害逐漸加重,細(xì)胞的通透性增大及滲漏加快。隨機械傷害時間的延長,受傷綠豆芽中的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性呈先升高后降低的趨勢,過氧化物酶(POD)活性呈逐漸降低趨勢,94×g下的SOD、
4、POD、CAT活性最高,從而有效地清除活性氧,隨著傷害程度的增加而降低。傷害處理0.5h時,出現(xiàn)“活性氧迸發(fā)”,隨著時間的延長及傷害程度的增加,O-2降低速率增大。總酚含量隨著傷害程度的增加及時間的延長逐漸增大,與綠豆芽培養(yǎng)過程中的褐變程度正相關(guān);傷害處理初,PPO活性隨著傷害程度的增大及時間的延長而降低,可能是細(xì)胞破損受到蛋白酶作用。
(3)抗病實驗結(jié)果表明:94×g下的綠豆芽的生長勢與對照接近;隨著傷害程度的增加,其褐
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