膠原蛋白的提取及其生物膜材料研究.pdf

1、膠原作為天然的動(dòng)物生物質(zhì)資源,在生物材料等領(lǐng)域的研究和應(yīng)用深受國(guó)內(nèi)外關(guān)注.膠原顯著的低免疫原性、生物相容性、可降解性,及止血功能是作為生物材料的優(yōu)勢(shì),并且在生物體內(nèi)容易被吸收、親水性強(qiáng)、無(wú)毒安全性好,因此,已被認(rèn)為是最有用的天然生物材料之一.在研究膠原的提取、溶液化學(xué)物理性質(zhì)和生物膜方面進(jìn)行了一些創(chuàng)新性研究.取得的主要學(xué)術(shù)創(chuàng)見如下:1.酸溶解加酶處理法提取膠原,條件控制在pH=1.9~2.1,酶用量40:1,時(shí)間30h較為合適.用氨基酸

2、分析、傅立葉變換紅外定性分析、差示掃描量熱測(cè)定幾種手段對(duì)其表征,顯示膠原樣品基本保留了三股螺旋結(jié)構(gòu),與天然膠原的相符性較好.2.將LLS和AFM結(jié)合用于研究稀溶液中明膠蛋白在等電點(diǎn)附近的自聚集過程,證實(shí)在等電點(diǎn)明膠是以兩性離子的形式存在;由pH變化誘導(dǎo)的聚集是基于靜電作用的分子間的團(tuán)簇聚集過程;通過AFM直接觀察到了酸溶膠原及其聚集體的高分辨圖象.3.應(yīng)用體積排阻色譜(SEC)、聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)、高效液相與電噴霧質(zhì)

3、譜聯(lián)用(HPLC/ESI-MS)這三種蛋白質(zhì)分子量分析測(cè)試技術(shù),來(lái)表征膠原水解產(chǎn)物的分子量,探索出較好的測(cè)定膠原水解產(chǎn)物分子量的方法;為建立水解反應(yīng)條件的控制與水解產(chǎn)物分子量之間的關(guān)系提供一定的依據(jù).4.用提取出的膠原樣品冷凍干燥成膜,根據(jù)生物膜材料的特性要求,論文選用了具有獨(dú)特和多樣的生理、藥理活性的單寧酸為交聯(lián)劑.單寧酸濃度為12.5％時(shí),T<,m>可達(dá)到81℃,與戊二醛交聯(lián)膠原膜的T<,m>接近,表明單寧酸交聯(lián)膠原有較高熱穩(wěn)定性,