伊犁黑蜂蜂膠對(duì)變形鏈球菌屬及其生物膜代謝影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過(guò)比較伊犁黑蜂蜂膠乙醇提取物(Ethanol extract of Propolis EEP)與氟化鈉對(duì)致齲變形鏈球菌屬產(chǎn)酸，產(chǎn)糖代謝關(guān)鍵酶乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenaseLDH)與葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(Glycosyltransferase GTFs)及其相關(guān)基因表達(dá)的影響來(lái)探討其對(duì)變形鏈球菌屬代謝影響機(jī)制。
　　方法:分別培養(yǎng)游離狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下生長(zhǎng)的變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌;并以含梯度濃度EEP的腦心

2、浸液培養(yǎng)基(Brian HeartInfusionBHI)，50mg/L NaF的BHI培養(yǎng)基，不含藥物的BHI培養(yǎng)基分別作為實(shí)驗(yàn)組，陽(yáng)性對(duì)照組與陰性對(duì)照組與不同生長(zhǎng)狀態(tài)的目的細(xì)菌作用18小時(shí)，①通過(guò)還原性輔酶I氧化法測(cè)定乳酸脫氫酶活性。②通過(guò)硫酸銨鹽析結(jié)合超濾離心法提取GTFs粗酶，蒽酮法測(cè)定GTFs活性。③RT-qPCR法測(cè)定各組LDH編碼基因ldh表達(dá)。④RT-qPCR法測(cè)定各組GTFs編碼基因gtfB，gtfC，gtfD表達(dá)。<

3、br>　　結(jié)果:
　　①在游離狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下，變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌各實(shí)驗(yàn)組和NaF組LDH活性均明顯受到抑制(P＜0.05)。
　　②在游離狀態(tài)和生物膜狀態(tài)下，EEP組，NaF組變形鏈球菌GTFs活性沒(méi)有變化(P＞0.05)。
　　③游離狀態(tài)時(shí)，變形鏈球菌，遠(yuǎn)緣鏈球菌實(shí)驗(yàn)組組和NaF組ldh表達(dá)明顯受到抑制（P＜0.05）;生物膜狀態(tài)下，變形鏈球菌實(shí)驗(yàn)組在MBEC、1/2MBEC、1/4MBEC濃度時(shí)ldh表達(dá)受

4、到抑制（P＜0.05），遠(yuǎn)緣鏈球菌實(shí)驗(yàn)組在MBEC、1/2MBEC、1/4MBEC、1/8MBEC濃度時(shí)ldh表達(dá)受到抑制(P＜0.05)，兩種細(xì)菌NaF組ldh表達(dá)差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　④游離狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下，變形鏈球菌實(shí)驗(yàn)組gtfB、gtfC、gtfD基因表達(dá)與陰性對(duì)照組沒(méi)有差異（P＞0.05）。游離與生物膜生長(zhǎng)狀態(tài)變形鏈球菌NaF組對(duì)gtfB基因表達(dá)有抑制作用（P＜0.05)。
　　結(jié)論:伊犁黑蜂