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文檔簡介
1、目的:觀察右旋糖酐酶及氟化鈉對變形鏈球菌單菌種生物膜初期形成和已形成的成熟生物膜結構的影響,檢測二者作用下細菌的粘附情況以及胞外多糖含量的改變,探討二者是否具有協(xié)同作用,分析可能的作用機制。 方法: 1.變形鏈球菌在厭氧培養(yǎng)條件下于玻璃片表面上形成單菌種生物膜,用熒光染料BOBO<'TM>-3和Calcofluor<'TM>進行染色,利用激光共聚焦顯微鏡觀察各處理因素作用下,變形鏈球菌初期形成生物膜的結構的改變;以及各處
2、理因素對成熟變鏈生物膜作用后其結構的變化。 2.利用<'2>H-TdR標記細菌,檢測各處理因素對變鏈生物膜初期形成時細菌粘附的影響;蒽酮法檢測各處理因素作用于成熟變鏈生物膜后其胞外多糖含量的變化。 結果: 1.右旋糖酐酶能夠抑制變形鏈球菌單菌種生物膜的初期形成,使細菌的黏附減少,生物膜的結構發(fā)生改變,破壞菌落之間的交聯(lián);低濃度的氟化鈉對變鏈生物膜初期形成的作用不大;二者聯(lián)合應用的效果優(yōu)于單獨作用,生物膜典型的樹枝
3、狀結構消失;而氟化鈉或是氟離子對右旋糖酐酶本身的活性沒有影響。 2.對成熟變形鏈球菌生物膜:右旋糖酐酶能夠部分降解已合成的胞外多糖,使生物膜多糖“骨架”之間的連接變少,網(wǎng)絡狀結構被破壞;而低濃度的氟化鈉對已形成的變鏈生物膜幾乎沒有作用;二者聯(lián)用較單獨作用生物膜結構改變更為明顯,生物膜被崩解,菌落之間的交聯(lián)破壞、減少,甚至消失,菌落散在,且胞外多糖含量的減少更顯著。 結論:右旋糖酐酶能抑制變形鏈球菌單菌種生物膜的初期形成,
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