變形鏈球菌單菌種早期生物膜的結(jié)構(gòu)和胞外多糖作用的初步探討.pdf

1、目的：動(dòng)態(tài)觀(guān)察變形鏈球菌單菌種生物膜的形成、結(jié)構(gòu)以及胞外多糖在生物膜中的分布，比較不同培養(yǎng)時(shí)間變形鏈球菌在生物膜黏附狀態(tài)下和浮游狀態(tài)下產(chǎn)生水溶性胞外多糖和水不溶性胞外多糖量的差異，分析多糖在生物膜不同形成階段的作用。 方法：1．變形鏈球菌微生物厭氧培養(yǎng)條件下在玻璃片上形成單菌種生物膜，用熒光染料BOBO<'TM>-3和Calconuor進(jìn)行熒光染色，激光共聚焦掃描顯微鏡連續(xù)觀(guān)察其形成的生物膜結(jié)構(gòu)和其中胞外多糖的分布。 2

2、．將變形鏈球菌分別進(jìn)行靜置培養(yǎng)和搖動(dòng)培養(yǎng)，以得到黏附狀態(tài)和浮游狀態(tài)下的變形鏈球菌，葸酮法測(cè)量?jī)煞N狀態(tài)下不同培養(yǎng)時(shí)間細(xì)菌產(chǎn)生的胞外多糖能力的差異。 結(jié)果：1．變形鏈球菌能夠在玻璃表面黏附形成致密的生物膜，多糖的黏附和聚集是生物膜初始黏附和發(fā)展的前提，在生物膜形成過(guò)程中存在細(xì)菌和多糖的消除和重建過(guò)程；成熟生物膜的特征是形成大量微菌落和溝壑間隙，鄰近黏附界面的生物膜基底部細(xì)菌密度較低，而中部則較致密。在生物膜發(fā)展和成熟期，胞外多糖分布

3、與菌落中細(xì)菌的分布基本一致，提示變形鏈球菌依靠其產(chǎn)生的胞外多糖聚集形成了生物膜。 2．不同培養(yǎng)時(shí)間生物膜細(xì)菌產(chǎn)糖能力是不同的，生物膜初始形成期變形鏈球菌產(chǎn)生多糖能力最強(qiáng)(P<0.05)，生物膜中水不溶性多糖的產(chǎn)生能力要比水溶性多糖的產(chǎn)生能力強(qiáng)，在生物膜形成過(guò)程細(xì)菌產(chǎn)糖能力是有波動(dòng)的；浮游細(xì)菌在早期培養(yǎng)時(shí)間產(chǎn)糖能力最大，隨后一直降低。浮游細(xì)菌水溶性多糖的合成能力要比水不溶性多糖的合成能力強(qiáng)。 結(jié)論：生物膜形成過(guò)程中每個(gè)階段