傣藥榼藤子炮制前后質(zhì)量分析及其毒理與藥效研究.pdf

1、傣藥榼藤子為豆科榼藤子屬植物榼藤子Entada phaseoloides (Linn.）Merr.的干燥種仁，該屬植物廣泛分布于美洲和非洲，全世界共約30種，我國(guó)產(chǎn)1種。榼藤子為我國(guó)傣族地區(qū)習(xí)用藥材，主要應(yīng)用于治療胃痛、痔瘡、水腫、便秘等病癥。現(xiàn)代藥理研究表明，榼藤子屬植物具有抗菌、抗氧化、降血糖、抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛等多種生物活性。為了更好地開發(fā)利用榼藤子，本文對(duì)榼藤子炮制前后的化學(xué)成分變化、毒性及有效性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。
　　

2、本研究采用HPLC-UV分別對(duì)榼藤子生品和炮制品的指紋圖譜進(jìn)行研究，用HPLC-ESI-MS對(duì)其生品共有峰進(jìn)行鑒定。結(jié)果標(biāo)示出生品16個(gè)共有峰，炮制品21個(gè)共有峰，應(yīng)用HPLC-MS和對(duì)照品保留時(shí)間的對(duì)應(yīng)初步鑒定了其中9個(gè)共有峰，主要為榼藤子三萜皂苷類和其他糖苷類成分的吸收峰。榼藤子生品炮制后，60％甲醇提取液中部分化學(xué)成分含量有不同程度的下降或上升，指紋圖譜的主峰數(shù)目也有變化，說明該法可以較全面地反映榼藤子炮制前后化學(xué)成分的差異，用于

3、控制生品和炮制品的內(nèi)在質(zhì)量。
　　 本研究采用HPLC法測(cè)定榼藤子生品與炮制品中Phaseoloideside D、Phaseoloideside E兩種皂苷的含量，結(jié)果表明榼藤子生品經(jīng)炮制后，Phaseoloideside D和Phaseoloideside E的含量略有下降，本法簡(jiǎn)便快捷，結(jié)果可靠，用于控制榼藤子生品和炮制品的質(zhì)量。
　　 本研究利用HP-20大孔樹脂對(duì)榼藤子總皂苷進(jìn)行富集與純化，以榼藤子皂苷Rhee

4、diinosede B作為含量測(cè)定的指標(biāo)，采用酶標(biāo)儀法建立了榼藤子總皂苷的含量測(cè)定方法。本法操作簡(jiǎn)單易行，結(jié)果穩(wěn)定，為榼藤子總皂苷的質(zhì)量控制提供參考。
　　 本研究采用灌胃給藥的方式，觀察榼藤子生品及不同炮制品對(duì)小鼠的急性毒性反應(yīng)，并測(cè)定其LD50；采用小腸炭末推進(jìn)法及甲基橙比色法，來考察榼藤子生品及炮制品對(duì)小鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的影響；采用S180小鼠模型進(jìn)行體內(nèi)抗腫瘤試驗(yàn)，榼藤子治療10d后，計(jì)算抑瘤率、脾指數(shù)、胸腺指數(shù)和肝臟指數(shù)；測(cè)

5、定荷瘤小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹、角叉菜膠致小鼠足跖腫脹炎癥模型，以及測(cè)定角叉菜膠致炎小鼠血清SOD和MDA水平，研究榼藤子的抗炎作用。結(jié)果榼藤子生品及炮制品1號(hào)，2號(hào)對(duì)小鼠的LD50分別為27.17 g/kg，35.13 g/kg，42.18 g/kg，表明榼藤子經(jīng)炮制后，毒性下降；榼藤子生品及炮制品能明顯促進(jìn)正常小鼠的腸蠕動(dòng)，對(duì)阿托品所致小腸運(yùn)動(dòng)的抑制有明顯的拮抗作用，但對(duì)新斯的

6、明所致小腸運(yùn)動(dòng)的亢進(jìn)無明顯作用；榼藤子炮制前后高、中、低劑量組對(duì)正常小鼠胃排空均有明顯抑制作用；榼藤子生品及炮制品總皂苷能顯著抑制小鼠S180肉瘤的生長(zhǎng)，提升荷瘤小鼠血清SOD的活力，降低MDA水平，表明榼藤子具有明顯的抗腫瘤作用；榼藤子生品和炮制品總皂苷對(duì)二甲苯誘發(fā)小鼠耳腫脹及角叉菜膠致小鼠足跖腫脹均有顯著的抑制作用，說明該藥有良好的抗炎作用；榼藤子生品與炮制品總皂苷可明顯增加角叉菜膠致炎小鼠血清中SOD的含量，減少角叉菜膠致炎小鼠血