土家藥隔山消炮制前后的毒理與藥效研究.pdf

1、隔山消為蘿摩科鵝絨藤屬植物，鵝絨藤屬是蘿藦科最大的屬，約200種植物，主要分布于西南各省區(qū)，也有分布在西北及東北各省區(qū)。在我國(guó)有53種12變種，其中多數(shù)具有藥用價(jià)值。其主要成分有C21甾體苷、生物堿、黃酮和糖類等，在臨床上和民間應(yīng)用于治療腫瘤、哮喘、咳嗽、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。
　　 隔山消是土家醫(yī)常用的一種藥材，在我國(guó)民族地區(qū)已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于治療多種疾病。中醫(yī)認(rèn)為其味甘、微苦、性微溫，具有補(bǔ)肝腎, 強(qiáng)筋骨，益精血, 健脾消食, 解毒

2、療瘡等功效。但隔山消據(jù)報(bào)道有毒，需經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單炮制后才可使用。但其毒性存在爭(zhēng)議，目前，關(guān)于隔山消的毒理學(xué)與藥效學(xué)研究報(bào)道較少，為了證實(shí)其是否有毒性及更好地開發(fā)利用隔山消，本文對(duì)炮制前后的隔山消進(jìn)行了毒理與藥效研究。
　　 通過(guò)對(duì)隔山消進(jìn)行小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)研究，對(duì)其安全性作出初步評(píng)價(jià)。通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)，判斷測(cè)定LD50的可能性，并據(jù)此測(cè)定LD50或MTD。結(jié)果隔山消生品的全粉、水提物、醇提物均未造成小鼠死亡，隔山消全粉、水提物、醇提物無(wú)急性

3、毒性反應(yīng)。
　　 通過(guò)對(duì)炮制前后的隔山消進(jìn)行藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)對(duì)比研究，對(duì)炮制前后的隔山消水提物進(jìn)行小鼠抗炎、胃腸運(yùn)動(dòng)和隔山消總苷抗腫瘤藥效實(shí)驗(yàn)對(duì)比研究，可知隔山消生品及炮制品(2、4 and 8g/kg)對(duì)小鼠耳廓腫脹及足跖腫脹均有明顯的抑制作用，并可顯著抑制醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血通透性增加。能夠明顯降低炎癥滲出液中PGE2和血清中MDA、NO含量，明顯提高小鼠血清SOD和CAT活力。炮制品1組與2組在抑制小鼠耳廓腫脹和小鼠足跖腫脹的效

4、果普遍比生品有所增強(qiáng)；抑制毛細(xì)血管通透性增加、減少炎癥滲出液中的PGE2含量和降低血清中NO含量等作用也比生品有所增強(qiáng)。隔山消炮制前后對(duì)正常小鼠胃腸運(yùn)動(dòng)有明顯的推進(jìn)作用，并降低胃殘留量。對(duì)阿托品所致胃腸動(dòng)力障礙動(dòng)物的腸推進(jìn)也具有顯著促進(jìn)作用。炮制品1組與2組在對(duì)正常小鼠胃腸運(yùn)動(dòng)與降低胃殘留量等作用也比生品有所增強(qiáng)。
　　 在體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)中，采用MTT法觀察隔山消總苷對(duì)Ec-109細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用，AO/EB熒光染色、DNA凝

5、膠電泳、western blotting方法研究隔山消總苷對(duì)Ec-109細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)效應(yīng)。結(jié)果顯示，用100、200、300μg/ml的隔山消總苷分別處理培養(yǎng)生長(zhǎng)良好的Ec-109細(xì)胞24、48和72 h后，Ec-109細(xì)胞存活率明顯低于對(duì)照組，并且有時(shí)效和量效關(guān)系。隔山消不同濃度的生品總苷作用Ec-109細(xì)胞48 h后，基因組DNA經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳，可發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度的增加，DNA片段化程度增強(qiáng)，細(xì)胞凋亡呈明顯的量效關(guān)系。采用wes