基于原子力顯微術(shù)的生物分子免疫識別.pdf

1、本文基于原子力顯微術(shù)(Atomic force microscopy, AFM),利用電化學(xué)、熒光半導(dǎo)體量子點(Quantum dots, QDs)標(biāo)記、透射電子顯微鏡(Transmission electronic microscope, TEM),共聚焦顯微鏡與流式細(xì)胞術(shù)等進(jìn)行與生物分子的結(jié)構(gòu)與功能相關(guān)的免疫識別研究。本文利用轉(zhuǎn)鐵蛋白抗血清(anti-transferrin serum,anti-Tf)免疫傳感器的納米尺寸和電化學(xué)分

2、析闡明了對脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(apo-transferrin,apo-Tf)和含鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(holo-transferrin,holo-Tf)響應(yīng)的anti-Tf免疫傳感界面的納米結(jié)構(gòu)與分子親和力。本文發(fā)現(xiàn),anti-Tf免疫傳感器的電化學(xué)響應(yīng)和生物傳感功能與AFM下的免疫傳感界面納米結(jié)構(gòu)與分子親和力特異性是比較吻合的。本文提出用“分子構(gòu)建學(xué)(Molecular architecture)”以特異性標(biāo)記和識別細(xì)胞表面分子的概念并同時應(yīng)用TEM

3、、共聚焦顯微鏡和AFM在K562細(xì)胞上驗證了“分子構(gòu)建學(xué)”在標(biāo)記和識別細(xì)胞表面分子時的特異性和適用性。AFM結(jié)果證實,“分子構(gòu)建學(xué)”可以清楚地定位K562細(xì)胞表面纖維粘連蛋白受體(Fibronectin receptor)。與傳統(tǒng)熒光標(biāo)記相比,“分子構(gòu)建學(xué)”對標(biāo)記所需配體的熒光特性并沒有嚴(yán)格的限制,因此“分子構(gòu)建學(xué)”有更好的配體多樣性。本文借助沒有配體耦聯(lián)的QDs和跟配體耦聯(lián)的QDs,應(yīng)用AFM、共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù),證實了細(xì)胞可以