基于納米金的三聚氰胺與DNA比色分析研究.pdf

1、納米金具有優(yōu)良的光學(xué)性能、電學(xué)性能、生物相容性以及表面易被修飾的特點(diǎn)，在免疫標(biāo)記、疾病的診斷與治療、藥物檢測(cè)等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景?；诩{米金的比色傳感一般步驟為：建立一種納米金反應(yīng)體系，使其與靶物質(zhì)特異性結(jié)合，從而發(fā)生物理、化學(xué)或者生物反應(yīng)，并通過轉(zhuǎn)換元件，輸出電信號(hào)或者光信號(hào)，最終完成對(duì)靶物質(zhì)的分析檢測(cè)。
　　目前，有關(guān)食品安全檢測(cè)的方法種類較多，傳統(tǒng)的檢測(cè)方法面臨著耗時(shí)、耗力、檢測(cè)成本高的難題，導(dǎo)致我國(guó)被檢測(cè)的食品不足食品

2、生產(chǎn)總量2％，檢測(cè)率極低。納米金比色方法具有高通量、簡(jiǎn)單、快速靈敏的特點(diǎn)，能夠更適用于食品安全的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。本研究從食品安全現(xiàn)狀著手，針對(duì)日益突出的食品摻假問題進(jìn)行了深入的研究工作。通過制備可控、穩(wěn)定以及尺寸均一的納米金球/棒，篩選出其中的一種納米金顆粒作為比色檢測(cè)工具，并進(jìn)一步將納米金球應(yīng)用到三聚氰胺以及摻假肉的檢測(cè)上。建立了無標(biāo)記納米金比色檢測(cè)三聚氰胺的方法以及巰基標(biāo)記納米金檢測(cè)摻假肉的方法。
　?。ㄒ唬┘{米金球/納米金棒的制備

3、：通過控制Na3Ct/HAuCl4的摩爾比值，制備了不同分散度、不同尺寸的納米金球。通過控制硝酸銀的用量，制得兩種長(zhǎng)徑比不同的金納米棒。將所制得的納米金顆粒用紫外可見光譜、TEM等表征，選擇一組形貌可控，穩(wěn)定性良好，尺寸均一的納米金球，供實(shí)驗(yàn)比色檢測(cè)用。
　?。ǘo標(biāo)記納米金比色檢測(cè)三聚氰胺體系的建立：未經(jīng)修飾的納米金能夠與三聚氰胺在共價(jià)配位鍵的作用下相互吸引，從而使得納米金相互靠近,最終可導(dǎo)致彼此間距減小而發(fā)生聚沉。在此基礎(chǔ)上

4、，通過檸檬酸根與硫酸氫根配基的交換，減小了納米金表面的空間位阻，并進(jìn)一步優(yōu)化反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、pH等條件。在最佳反應(yīng)條件下，反應(yīng)體系檢測(cè)范圍為0.08~12 mg/kg，線性相關(guān)系數(shù)為0.993，檢測(cè)回收率范圍是84%~98%。試驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，靈敏度高。當(dāng)牛奶中三聚氰胺濃度超過8 mg/kg時(shí)，可用肉眼檢測(cè)。
　?。ㄈ€基標(biāo)記納米金識(shí)別肉制品中的雞源性成分：基于雞的 D-loop基因，設(shè)計(jì)一端含巰基的雞的特異性引物。以試樣提取的