具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光現(xiàn)象的熒光多肽的制備及其生物應(yīng)用.pdf

1、高選擇性和敏感度的熒光探針越來(lái)越廣泛的被應(yīng)用于感應(yīng)分析和光學(xué)成像。傳統(tǒng)的熒光探針?lè)肿油ǔ?huì)表現(xiàn)出聚集誘導(dǎo)淬滅的現(xiàn)象。獨(dú)特的聚集誘導(dǎo)發(fā)光（AIE）提供了一種能夠徹底解決 ACQ問(wèn)題的方法。AIE熒光基團(tuán)擁在溶液中只有很弱的發(fā)射量。當(dāng)這些分子聚集在一起的時(shí)候，可以呈現(xiàn)出非常強(qiáng)的熒光，這是由于它們?cè)诰奂癄顟B(tài)下會(huì)抑制分子內(nèi)的旋轉(zhuǎn)。AIE熒光基團(tuán)的這種吸引人的特性為熒光分子和光穩(wěn)定納米聚集物在特異性檢測(cè)和成像方面的發(fā)展提供了一個(gè)嶄新的平臺(tái)。

2、>　　癌癥是目前世界范圍內(nèi)最容易導(dǎo)致死亡的疾病，對(duì)于癌癥早期的檢測(cè)與治療對(duì)于癌癥的治療具有非常重大的意義。研究發(fā)現(xiàn)凋亡的癌細(xì)胞能夠表達(dá)caspase-3/7，同時(shí)癌細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽的含量也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常細(xì)胞，因此，我們將AIE熒光探針與caspase3/7,GSH作用的多肽序列及AcDEVD-COOH及-S-S,相連接，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)癌細(xì)胞的特異性的檢測(cè)。同時(shí)我們將多肽自主裝集團(tuán)及有芳香集團(tuán)的多肽氨基酸序列-GFFY-引入熒光探針中。我們合成了

3、兩組特異性的熒光探TPE-GFFYK-(AcDEVD)-COOOH,TPE-K(AcDEVD)-COOH TPE-GFFY-E-SS- EE–COOH, TPE-S-S-EE-COOH。通過(guò)在體外的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，由于多肽序列較好的水溶性，低濃度的熒光探針單分散在 PBS中不發(fā)光。經(jīng)過(guò)caspase3/7，以及GSH,作用后，熒光探針親水部分AcDEVD-，-EE-COOH被切掉后，熒光集團(tuán)在 PBS中聚集誘導(dǎo)發(fā)光。我們發(fā)現(xiàn)含有自組裝序列的

4、熒光探針與不含有組裝序列的同功能的熒光探針相比，在被Caspase-3作用和被谷胱甘肽還原和之后，具有更強(qiáng)的熒光對(duì)比度。這是由于自組裝集團(tuán)的有序組裝使得熒光集團(tuán)具有更強(qiáng)的聚集程度，從而使探針在被caspase3酶切，GSH還原后發(fā)出更強(qiáng)的熒光對(duì)。這一現(xiàn)象可以降低了應(yīng)用于監(jiān)測(cè)的 AIE熒光探針的濃度，從而提高了檢測(cè)的靈敏度。我們將AIE熒光分子探針應(yīng)用于凋亡的HepG2細(xì)胞的檢測(cè)，和A549細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽的檢測(cè)，得到了與體外相一致的實(shí)