利用杜仲內(nèi)生真菌防治小麥病害的研究.pdf

1、本研究以農(nóng)作物的重要病害為靶標，通過對藥用植物杜仲拮抗內(nèi)生真菌資源的篩選、鑒定和系統(tǒng)發(fā)育分析，闡明藥用植物杜仲中拮抗內(nèi)生真菌的種群組成特征；通過分析拮抗真菌在小麥根際的生長對小麥根際及體內(nèi)微生物菌群的影響；研究拮抗真菌對小麥病害防治效果及小麥植株抗病性的影響，為提高生防菌的植株定殖能力、穩(wěn)定和提高防效奠定基礎。本項研究將拓展人們對生防微生物功能多樣性及其應用的新視角，對植物病害的生物防治意義重大。主要研究結(jié)果如下：
　　1.較為系

2、統(tǒng)地研究了杜仲內(nèi)生真菌的分布特點。我們采取組織分離得方法從植物杜仲的葉、莖、果實、皮和根等5個部位中總共獲得52株內(nèi)生真菌，并以形態(tài)學和分子生物學為依據(jù)對所分離的52株內(nèi)生真菌進行鑒定，最后鑒定出這52株內(nèi)生真菌為8個屬，分別為：黑孢菌屬（Nigrospora）、擬盤多毛孢屬（Pestalotiopsis）、炭疽菌屬（Colletotrichum）、肉座菌屬（Hypocreales）、擬莖點霉屬（Phomopsis）、梭孢殼屬（Thie

3、lavia）、鏈格孢屬（Alternaria）和漆斑菌屬（Myrothecium）。且內(nèi)生真菌在杜仲組織中的分布呈現(xiàn)出一定的組織專一性，其中，漆斑菌屬（Myrothecium）在果實和根中存在，肉座菌屬（Hypocreales）和鏈格孢屬（Alternaria）只在果實中分離得到，而黑孢菌屬（Nigrospora）、擬盤多毛孢屬（Pestalotiopsis）、擬莖點霉屬（Phomopsis）、炭疽菌屬（Colletotrichum）存

4、在于杜仲的葉、莖、果實三個部位中。
　　2.根據(jù)平板對峙法和次生代謝生長速率法測定了52株內(nèi)生真菌對這3種病原菌的抑制效果，這3種病原菌分別為：玉米莖基腐病菌(Fusarium graminearum)、小麥全蝕病菌(Gibberellazeae)和小麥紋枯病菌(Rhizoctonia cerealis)。結(jié)果表明，在離體條件下，杜仲內(nèi)生真菌對3種植物病原菌有不同程度的抑制作用。其中， DZJ14分別對小麥全蝕病菌和小麥紋枯病菌的

5、抑菌效果較好。隨后的活體試驗結(jié)果顯示，經(jīng)接種至小麥根際土壤中的DZJ14處理的小麥樣品，其苗期小麥紋枯病的發(fā)病率為16.88％，小麥全蝕病的發(fā)病率為8.7%，分別明顯低于未經(jīng)DZJ14處理的小麥紋枯病(69.81%)以及小麥全蝕病的發(fā)病率(50%)，且對苗期小麥的生長具有明顯的促生作用。
　　3.利用稀釋平板法檢測了經(jīng)拮抗菌株DZJ14處理的小麥植株根際土壤及其體內(nèi)微生物（真菌、細菌）的變化情況，結(jié)果表明經(jīng)拮抗菌株DZJ14處理的

6、小麥植株根際土壤中真菌數(shù)量顯著升高，細菌數(shù)量降低，小麥植株體內(nèi)的真菌數(shù)量和對照相比數(shù)量顯著升高，細菌數(shù)量降低。此外，通過對拮抗菌株DZJ14根際處理，調(diào)查了小麥不同生長時期的麥植株中所含的PPO、POD和PAL三種防御酶活性進行了測定，結(jié)果表明，經(jīng)菌株DZJ14定殖處理的盆栽小麥和大田小麥植株中所含的PPO、POD和PAL三種防御酶的活性與對照組相比均顯著升高。由此可知，外來菌株DZJ14接種至小麥根際土壤中，能明顯提高小麥植株的誘導防