核黃素高產(chǎn)菌株的選育與發(fā)酵過程的優(yōu)化.pdf

1、我們選擇高產(chǎn)核黃素突變株的篩選及其發(fā)酵過程的優(yōu)化作為學(xué)位論文的研究課題，希望能促進(jìn)我國核黃素生產(chǎn)技術(shù)的發(fā)展，縮短國內(nèi)外差距，取得了預(yù)期的結(jié)果，其主要結(jié)果如下：選用阿氏假囊酵母Eremotheciumashbyii作為出發(fā)菌株，根據(jù)代謝控制育種理論，針對解除核黃素的前體物嘌呤生物合成途徑中所受的代謝調(diào)節(jié)，選用一些結(jié)構(gòu)類似物并結(jié)合亞硝基胍(NTG)誘變進(jìn)行抗性篩選，獲得了一株同時(shí)具有8-氮鳥嘌呤、甲硫氨酸亞砜和甘氨酸抗性的核黃素高產(chǎn)突變株，

2、命名為E.ashbyiiGly-13-25，其核黃素產(chǎn)量(1141.61mg/L)與出發(fā)菌株E.ashbyiiA-30(776.49mg/L)相比，提高了47.0％，然后對其發(fā)酵培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化。首先利用單次單因子法研究了各種因子：碳源，氮源，金屬離子，陰離子，Mg2+濃度，裝液量，接種量，種齡，玉米漿，pH值對核黃素發(fā)酵的影響，初步確定了突變株的發(fā)酵培養(yǎng)條件依次為：最佳碳源為糖蜜；最佳氮源為酵母膏；對產(chǎn)核黃素有較大促進(jìn)作用的金屬離子為

3、Mn2+、Co2+、Zn2+、Cu2+并結(jié)合陰離子的影響，確定在培養(yǎng)基中添加MnSO4、ZnCl2、CuCl2、CoCl2四種無機(jī)鹽，其濃度為4mg/L；Mg2+濃度為0.1mg/L；最佳種齡為48h；最佳接種量為5％；最佳裝液量為20mL(100mL搖瓶中)；添加刺激物——玉米漿，濃度為20ml/L；發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH值為6.5。本研究結(jié)合菌種選育和發(fā)酵過程優(yōu)化，使得菌株的核黃素發(fā)酵產(chǎn)量達(dá)到了一定程度的提高，但與國外先進(jìn)水平相比，仍有