維生素B-,12-高產(chǎn)菌株的選育及其發(fā)酵過程優(yōu)化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本論文選用謝氏丙酸桿菌結合理性育種技術,分別采用亞硝基胍(NTG)和紫外線(UV)誘變結合抗代謝抑制劑法成功地得到一株穩(wěn)定的高產(chǎn)菌株,命名為P.shermaniiN-U-11。在原始的發(fā)酵條件下,高產(chǎn)突變株P.shermaniiN-U-11搖瓶發(fā)酵72h的維生素B12產(chǎn)量(27.06mg/L)較之母株P.shermaniiY-31(15.89mg/L)提高了70.3%。利用單次單因子法確定了該突變株P.shermaniiN-U-11合成

2、維生素B12的最佳碳源為葡萄糖+糖蜜;最佳碳源含量為15%;最佳氮源為玉米漿;對產(chǎn)維生素B12有促進作用的金屬離子按照Ca2+、K+、Fe2+、Al3+、Cd2+、Ba2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Mn2+的順序,其促進作用依次增強;最適Co2+離子濃度為70mg/L;最適Mg2+離子濃度為10mg/L,并且最適鎂鹽為MgCl2;最佳裝液量為20%;最佳菌齡為16h;最佳接種量為12.5%。通過單次單因子優(yōu)化,突變株P.sherm

3、aniiN-U-11發(fā)酵72h的維生素B12產(chǎn)量較原始培養(yǎng)條件下維生素B12產(chǎn)量(27.06mg/L)提高了52.2%。利用Plackett-Burman設計法從初始pH值、總碳量、W葡萄糖:W糖蜜、玉米漿、KH2PO4、(NH)2HPO4、FeSO4、MgCl2、MnSO4、CaCl2、NaCl和CoCl2的濃度共十二個因子中篩選出W葡萄糖:W糖蜜、玉米漿、MnSO4和CaCl2四個因子對維生素B12的產(chǎn)量影響較大,這四個因子對目標的

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