長期高脂飲食小鼠附睪脂肪組織肥大細胞調(diào)控胰島素抵抗的作用機制研究.pdf

1、肥胖被定義為一種慢性低度的炎性疾病。肥胖可以引發(fā)2型糖尿病(T2D)、心血管疾病、肝臟脂肪變性等一系列代謝疾病，嚴重降低人類壽命與生命質(zhì)量。已有報道發(fā)現(xiàn)，在長期高脂飲食的(LDIO)小鼠中，高脂飲食的第16周前其附睪脂肪組織(EAT)不斷增大;而在16周之后EAT卻逐漸萎縮。隨著EAT的萎縮，小鼠的胰島素抵抗也顯著的降低。然而，導(dǎo)致胰島素抵抗降低的分子和細胞生物學(xué)機制尚不清楚。為了解決這一問題，本課題主要研究LDIO小鼠高脂飲食喂養(yǎng)后期

2、與胰島素抵抗水平直接相關(guān)的EAT炎性改變，并初步明確了肥大細胞在這一改變中的調(diào)控機制。
　　本論文利用5周齡雄性C57BL/6小鼠，分別用低脂或高脂飲食處理5、10、15、20和25周，并得到以下主要結(jié)果:
　　1)在處理的第5-15周間，高脂組小鼠的葡萄糖耐受和胰島素敏感性顯著惡化;而在15周后，其葡萄糖耐受和胰島素敏感性逐漸改善。
　　2)肥胖引發(fā)的脂肪組織巨噬細胞的炎性極化是導(dǎo)致系統(tǒng)葡萄糖穩(wěn)態(tài)改變的主要原因，利用

3、流式細胞術(shù)及定量PCR進一步研究了EAT巨噬細胞的水平。伴隨著上述胰島素穩(wěn)態(tài)的改變，高脂組小鼠EAT促炎性M1巨噬細胞與抗炎性M2巨噬細胞的比例及炎性細胞因子的表達也逐漸改變。
　　3)肥大細胞(MCs)作為一種免疫細胞，在肥胖個體的脂肪組織中大量聚集，聚集的肥大細胞在脂肪組織中的作用仍不完全清楚。為了探究MCs在高脂飲食后期胰島素抵抗和EAT巨噬細胞炎性極化改變中的作用，本文采用流式細胞術(shù)分析了EAT中肥大細胞的數(shù)目變化。結(jié)果顯

4、示，在高脂飲食的第15-25周， EAT中MCs的數(shù)量大幅提高，推測MCs可能參與EAT中巨噬細胞的極化改變。
　　4)進一步，體外培養(yǎng)的肥大細胞BMMCs能夠明顯抑制GM-CSF誘導(dǎo)骨髓衍生的巨噬細胞BMDMs M1極化。
　　5)5-羥色胺作為MCs分泌的重要介質(zhì)，可以抑制巨噬細胞的炎性極化。而5-羥色胺合成關(guān)鍵酶的抑制劑LX1031處理的BMMCs則失去了對BMDMs的極化抑制作用。另外，通過流式細胞術(shù)和定量PCR，我