胃旁路手術(shù)調(diào)節(jié)Goto-Kakizaki大鼠脂肪組織胰島素抵抗的機制研究.pdf

1、目的:
　　 目前糖尿病已經(jīng)成為全世界許多國家的常見病和多發(fā)病,其死亡率居第三位。據(jù)研究預(yù)測,到2030年世界范圍內(nèi)成人(20-79歲)糖尿病的發(fā)病率將達到7.7%,糖尿病患者總數(shù)將達到4.39億人。目前,我國9240萬成年人罹患糖尿病,1.482億成年人處于前糖尿病狀態(tài),2型糖尿病占糖尿病的比例達到90%以上,糖尿病的快速增長主要是由于2型糖尿病的快速增長造成的,糖尿病已經(jīng)成為威脅我國居民健康、阻礙經(jīng)濟發(fā)展和社會進步的嚴重疾病

2、之一。糖尿病的傳統(tǒng)治療方式包括運動、飲食調(diào)節(jié)、口服降糖藥物、胰島素注射等。然而,傳統(tǒng)的治療方式不能從根本上治愈糖尿病,甚或血糖的長期穩(wěn)定亦很難保持,從而導(dǎo)致糖尿病相關(guān)腎病、血管性病變、神經(jīng)性病變等嚴重并發(fā)癥的發(fā)生。在內(nèi)科治療中即使保持血糖的穩(wěn)定也不能縮短并發(fā)癥發(fā)生的時間和改善預(yù)后。2型糖尿病病人主要表現(xiàn)為胰島細胞功能受損和進行性加重的胰島素抵抗。在2型糖尿病發(fā)病機制中,胰島素抵抗是重要環(huán)節(jié)。胰島素抵抗導(dǎo)致組織對葡萄糖攝取、利用下降,胰島

3、素信號通路中相關(guān)分子的變化在胰島素抵抗中有著非常重要的作用。脂肪細胞是胰島素作用的主要靶細胞之一,是葡萄糖攝取和利用的重要細胞,隨著對胰島素抵抗發(fā)病機理的深入研究,越來越認識到其與胰島素抵抗關(guān)系密切,其分泌的眾多的脂肪因子在調(diào)節(jié)胰島素抵抗中發(fā)揮著重要作用。Pories于1987年首先報道胃旁路手術(shù)可以在不用任何藥物及飲食控制的情況下保持血糖的長期穩(wěn)定,在內(nèi)科治療2型糖尿病及控制并發(fā)癥普遍效果欠佳的情況下,這一作用無疑為廣大2型糖尿病病人

4、帶來一絲希望。目前,越來越多的患者接受胃旁路手術(shù)治療,其療效也得到充分肯定,2010年美國糖尿病協(xié)會將胃旁路手術(shù)作為2型糖尿病治療的標(biāo)準(zhǔn)治療方法。目前胃旁路手術(shù)被認為是治療肥胖癥合并2型糖尿病的最為有效的手術(shù)方式之一。胃旁路手術(shù)治療肥胖合并2型糖尿病的確切機制仍未十分清楚,已有研究證實胃旁路手術(shù)可以緩解2型糖尿病患者的胰島素抵抗,然而其確切機制仍不明確,如能明確胃旁路手術(shù)緩解胰島素抵抗的確切機制,將對胃旁路手術(shù)的推廣及發(fā)展有著十分重要的

5、意義,并將有更多的患者從中受益。本實驗采用自發(fā)性2型糖尿病大鼠Goto-Kakizaki(GK)大鼠,建立胃旁路手術(shù)的手術(shù)模型,檢測手術(shù)后脂肪組織胰島素信號通路中關(guān)鍵分子的變化,并于體外運用細胞實驗進行驗證相關(guān)分子變化對葡萄糖轉(zhuǎn)運的影響,以了解胃旁路手術(shù)對GK大鼠的血糖調(diào)控和改善脂肪組織胰島素抵抗的機制。
　　 方法:
　　 用GK大鼠作為研究對象,以正常Wistar大鼠作為正常對照,為GK大鼠實施胃旁路手術(shù)。檢測術(shù)后各

6、組血清中TNFα的變化,檢測各組脂肪組織中TNFαIRS-1、P13Kp85a、GLUT4mRNA的變化,檢測各組脂肪組織中PPARγ2、IRS-1、P13Kp85a、細胞膜GLUT4、細胞總GLUT4蛋白變化。將經(jīng)3T3-L誘導(dǎo)分化的成熟脂肪細胞作為研究對象,用地塞米松誘導(dǎo)成熟脂肪細胞建立胰島素抵抗模型,檢測各組葡萄糖消耗量以驗證模型建立的成功,用0、5、10、20μmol/L的15d-PGJ2干預(yù)胰島素抵抗脂肪細胞,檢測各組IRS-

7、1、P13Kp85a、GLUT4mRNA和IRS-1、P13Kp85a、細胞膜GLUT4、細胞總GLUT4蛋白變化,觀察PPARγ2的激活對胰島素信號通路分子的影響,以對體內(nèi)相關(guān)分子的激活對胰島素信號通路的影響進行體外驗證。
　　 結(jié)果:
　　 胃旁路手術(shù)后各組血清中TNFα無明顯變化,脂肪組織中TNFα、IRS-1、P13Kp85a、GLUT4基因轉(zhuǎn)錄上調(diào)。脂肪組織中PPARγ2、IRS-1、P13Kp85α、細胞膜G

8、LUT4、細胞總GLUT4蛋白表達量均增加,15d-PGJ2可以使IRS-1、P13Kp85α、GLUT4mRNA表達量上調(diào),使IRS-1、P13Kp85α、細胞膜GLUT4、細胞總GLUT4蛋白表達增加,而且mRNA和蛋白的表達量和15d-PGJ2的濃度有量效關(guān)系。
　　 結(jié)論:
　　 胃旁路手術(shù)可改善GK大鼠空腹及餐后血糖,改善胰島素抵抗,這一作用是通過促進胰島素信號通路中相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯得以實現(xiàn),胃旁路手術(shù)增強