GPER對(duì)于兔耳增生性瘢痕作用的研究.pdf

1、目的:
　　1.通過局部應(yīng)用雌素來觀察并驗(yàn)證其對(duì)于兔耳增生性瘢痕的影響作用。
　　2.研究G蛋白偶聯(lián)雌激素受體(GPER)介導(dǎo)的雌激素快速非基因組效應(yīng)對(duì)于兔耳增生性瘢痕的影響及作用機(jī)制。
　　方法：
　　選取3-6月齡新西蘭大耳兔，36只，體重2.5-3kg,雌性，要求兔耳皮膚完整無破損；適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后，在兔的單側(cè)耳腹面共做6個(gè)直徑為10mm的圓形創(chuàng)面，間距大于15mm,深達(dá)軟骨層并刮除軟骨膜，建立兔耳增生性瘢

2、痕模型。按照隨機(jī)數(shù)字表法將36只新西蘭大耳兔分為6個(gè)組，每組6只：(control組)為空白對(duì)照組；(DMSO組)為溶劑組；（E2組)為雌激素組；（G1組)為GPER激動(dòng)劑組；（E2+G15組)為雌激素+GPER拮抗劑組；(G1+G15組)為GPER激動(dòng)劑+拮抗劑組。于造模后第15天，4個(gè)給藥組分別用微量注射器在兔耳根部皮下注射E20.025mg/（kg·d）,G10.06mg/（kg·d），G150.06mg/（kg·d），溶劑組注射

3、經(jīng)PBS稀釋為10％的DMSO溶液，對(duì)照組不予任何處理。持續(xù)注射14天后，觀察各組瘢痕增生情況并取標(biāo)本，對(duì)比各組瘢痕增生指數(shù)（SEI）、成纖維細(xì)胞（FB）、膠原纖維以及通過PCR檢測(cè)TGF-β1、collagen III、collagen I的表達(dá)量。
　　結(jié)果：
　　1.形態(tài)學(xué)觀察: E2組和G1組相對(duì)于空白對(duì)照組，瘢痕突出周圍正常皮膚更為明顯，顏色較深多為暗紅色，中央部最為厚實(shí)，質(zhì)地較硬；E2+G15組和G1+G15組對(duì)

4、比E2組和G1組，瘢痕中央厚度明顯降低，顏色也較淺為粉紅色，部分與正常皮膚接近，質(zhì)地明顯變軟；DMSO組相對(duì)于空白對(duì)照組瘢痕增生情況差別不大。
　　2.HE染色和MASSON染色觀察：E2組和G1組相對(duì)于空白對(duì)照組，瘢痕組織中存在大量的成纖維細(xì)胞，血管生長豐富，細(xì)胞外基質(zhì)有大量沉積，膠原纖維多而粗大，排列紊亂。E2+G15組和G1+G15組對(duì)比E2組和G1組，成纖維細(xì)胞明顯減少，血管分布較少，細(xì)胞外基質(zhì)沉積減少，膠原纖維也相對(duì)減少

5、，DMSO組相對(duì)于空白對(duì)照組膠原纖維、成纖維細(xì)胞和血管分布未見特殊異常。
　　3.瘢痕增生指數(shù)：E2組和G1組明顯高于空白對(duì)照組（P＜0.05），E2+G15組相對(duì)于E2組明顯降低（P＜0.05），G1+G15組相對(duì)于G1組也明顯降低（P＜0.05），而空白對(duì)照組和DMSO組無明顯差異（P＞0.05）。
　　4. RT-PCR檢測(cè)：與空白對(duì)照組相比，E2組和G1組的collagenⅠ、collagenⅢ、TGF-β1的mRN

6、A表達(dá)量明顯升高（P＜0.05）；而E2+G15組和G1+G15組分別對(duì)比E2組和G1組時(shí)，我們又發(fā)現(xiàn)collagenⅠ、collagenⅢ、TGF-β1的mRNA表達(dá)量明顯降低（P＜0.05）；DMSO組相對(duì)于空白對(duì)照組無明顯差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.雌激素對(duì)于兔耳增生性瘢痕具有促進(jìn)作用。
　　2.G蛋白偶聯(lián)雌激素受體（GPER）對(duì)于兔耳增生性瘢痕具有影響作用，激活GPER能夠促進(jìn)兔耳增生性瘢痕的形