車前草提取物及其有效成分的抗菌活性研究.pdf

1、車前草(Plantago asiatica L.)屬車前科植物，在民間多用干燥全草入藥。具有祛痰、明目等功效。近年來(lái)，隨著對(duì)車前草研究的不斷深入，人們從車前草中分離出了較多有效成分，但是對(duì)抗菌活性方面研究較少，并且大多數(shù)藥理研究都是以車前草粗提物為主。因此本文以分離篩選具有抗菌活性的單體化合物為目的，從而尋找到在抗菌方面具有開發(fā)價(jià)值的先導(dǎo)化合物。
　　本實(shí)驗(yàn)首先對(duì)車前草全草進(jìn)行甲醇冷浸法提取，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取

2、，通過(guò)抗菌實(shí)驗(yàn)對(duì)萃取出的三個(gè)組分的抗菌活性依次進(jìn)行活性篩選，最終確定車前草的石油醚層和乙酸乙酯層對(duì)變形鏈球菌和金黃色葡萄球菌有較好的抑制性。采用正相硅膠柱色譜、TLC薄層色譜法、反相硅膠色譜、重結(jié)晶、制備型薄層層析和羥丙基葡聚糖凝膠色譜方法，對(duì)車前草的石油醚層和乙酸乙酯層進(jìn)行系統(tǒng)分離，共分離出化合物I（油酸）、化合物II（亞麻酸甲酯）、化合物III（亞油酸）、化合物IV（十六烷酸）、化合物V（山楂酸）、化合物VI（β-谷甾醇）、化合物V

3、II（齊墩果酸）和化合物VIII（熊果酸）等八個(gè)化合物。
　　首先對(duì)這八個(gè)化合物進(jìn)行初步活性篩選，發(fā)現(xiàn)化合物I、化合物III、化合物V、化合物VII和化合物VIII有抗菌活性。它們對(duì)變形鏈球菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌和芽孢桿菌這些革蘭氏陽(yáng)性菌有較好的抑制性，其最小抑菌濃度(MIC)值為16~128μg/mL。對(duì)大腸桿菌和綠膿桿菌這些革蘭氏陰性菌也有一定的抗菌活性，其MIC值為64~256μg/mL。其中化合物V和化合物VIII對(duì)

4、大腸桿菌活性尤為突出，比對(duì)照藥硫酸鏈霉素要好，MIC值達(dá)到了64μg/mL。在對(duì)耐藥菌的活性測(cè)試中，化合物 I、化合物 V和化合物 VIII也表現(xiàn)出了抑制性，MIC值為16~128μg/mL。最后在細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，這五種化合物在相同的抗菌濃度下對(duì)細(xì)胞沒有毒性傷害；在抗氧化實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，化合物 VII和化合物 VIII有一定的抗氧化性；在細(xì)菌耐藥性的測(cè)試中發(fā)現(xiàn)，化合物 VIII不易產(chǎn)生耐藥性，其最小殺菌濃度(MBC)值與MIC值幾乎相等