基質(zhì)金屬蛋白酶與氣道重塑關(guān)系的研究.pdf

1、第一部分甲潑尼龍對(duì)哮喘小鼠MMP-9的表達(dá)及對(duì)氣道炎癥的影響
　　 目的：探討甲潑尼龍對(duì)哮喘小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達(dá)及對(duì)氣道炎癥的影響。
　　 方法：30只Balb/c雌性小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為哮喘組(n=10)、甲潑尼龍治療組(n=10)和生理鹽水對(duì)照組(n=10)。通過(guò)雞卵清白蛋白腹腔注射致敏和滴鼻激發(fā)的方法建立小鼠急性哮喘模型。觀察病理學(xué)和支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞計(jì)數(shù)。采用免疫組化和Western blot法觀察M

2、MP-9蛋白的表達(dá)。采用明膠酶譜分析法觀察哮喘組MMP-9蛋白的表達(dá)。采用RT-PCR的方法測(cè)定MMP-9mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1．與對(duì)照組比較，哮喘組顯示明顯的氣道痙攣，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，BALF細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)增高(P值均＜0.01)。與哮喘組比較，甲潑尼龍治療組病理顯示氣道痙攣程度和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)均減輕，BALF中細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞均減少(P值均＜0.01)。
　　 2．與對(duì)照組比

3、較，免疫組化和明膠酶譜分析顯示哮喘組MMP-9蛋白表達(dá)明顯增加，甲潑尼龍治療組較哮喘組表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均＜0.01)。
　　 3．與對(duì)照組比較，RT-PCR結(jié)果顯示哮喘組MMP-9 mRNA表達(dá)增多，而甲潑尼龍治療組較哮喘組MMP-9 mRNA表達(dá)降低(P值均＜0.05)。
　　 4．與對(duì)照組比較，Western blot結(jié)果顯示哮喘組MMP-9蛋白表達(dá)增高，而甲潑尼龍治療組MMP-9蛋白表達(dá)較哮喘組降低

4、(P值＜0.05)。
　　 結(jié)論：實(shí)驗(yàn)證實(shí)了MMP-9在哮喘小鼠肺組織中表達(dá)增高，可能是導(dǎo)致哮喘炎癥的機(jī)制之一。甲潑尼龍可能通過(guò)抑制MMP-9的表達(dá)，從而抑制哮喘炎癥反應(yīng)。
　　 第二部分 MMP-9、TIMP-1在哮喘小鼠和氣道重塑小鼠表達(dá)作用的比較研究
　　 目的：探討基質(zhì)金屬蛋白酶-9和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1在小鼠哮喘模型和氣道重塑模型中表達(dá)作用的異同及意義。
　　 方法：30只Balb/c雌性小

5、鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為哮喘組(n=10)、氣道重塑組(n=10)和生理鹽水對(duì)照組(n=10)。通過(guò)雞卵清白蛋白滴鼻和腹腔注射的的方法分別建立小鼠哮喘模型和氣道重塑模型。通過(guò)病理學(xué)觀察氣道炎癥和氣道重塑。用免疫組化法測(cè)定MMP-9和TIMP-1蛋白的表達(dá)；RT-PCR測(cè)定MMP-9和TIMP-1的基因水平表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1．病理學(xué)顯示哮喘組氣道痙攣，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)：氣道重塑組呈現(xiàn)氣道上皮指狀增生，管腔分泌物增多

6、，上皮下纖維化。
　　 2．免疫組化結(jié)果顯示哮喘組MMP-9為8868.8±3544.5，TIMP-1為4783±1508.1，二者比值為1.85;氣道重塑組MMP-9為4383.1±2498.6，TIMP-1為6542.3±3026.6，氣道重塑組MMP-9/TIMP-1的比值為0.67。兩組的MMP-9、TIMP-1進(jìn)行分別比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p均＜0.05)。
　　 3.RT-PCR結(jié)果顯示氣道重塑組MMP-9