硝酸甘油預(yù)處理的心肌民保護(hù)作用及對caveolin-3表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討不同劑量硝酸甘油對大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響及對大鼠離體缺血再灌注心肌的影響,并探討其對心肌組織中caveolin-3表達(dá)的影響。
　　 方法：⑴32只雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組(n=8):缺血再灌注(I/R)組、2μg/(kg·min)硝酸甘油預(yù)處理(PC1)組、4μg/(kg·min)硝酸甘油預(yù)處理(PC2)組、6μg/(kg·min)硝酸甘油預(yù)處理(PC3)組。分別用靜脈注射微量泵通過尾靜脈泵入不同劑量的硝酸甘油,持續(xù)泵

2、入1 h,實(shí)時(shí)監(jiān)測大鼠頸動(dòng)脈血壓。采用Langendorff離體心臟灌流方法,制備大鼠離體心臟缺血再灌注損傷模型:大鼠離體心臟全心停跳30 min,再灌注90min,灌注液為經(jīng)95％O2～5%CO2混合氣體飽和的K-H液。分別于停跳前、再灌注5 min、10 min、30 min監(jiān)測各組大鼠左心功能變化情況:HR、LVSP、+dp/dtmax及檢測冠脈流出液的含量及心肌組織中cTnI和NO的含量。⑵24只SD大鼠,完全隨機(jī)分為3組(n=

3、8):缺血再灌注(I/R)組、小劑量硝酸甘油預(yù)處理(PC)組和預(yù)處理干預(yù)(M)組。采用Langendorff離體心臟灌流方法,制備大鼠離體心臟缺血再灌注損傷模型,離體心臟灌注液為經(jīng)95%O2-5%CO2混合氣體飽和的K-H液:I/R組大鼠離體心臟全心停跳30 min,再灌注90 min;PC組在心肌缺血前1 h靜脈持續(xù)泵入小劑量硝酸甘油[2μg/(kg·min),總量120μg/kg],余處理同I/R組;M組灌注液為含0.2 mmol/

4、L甲基-β-環(huán)糊精(M-β-CD)的K-H液,余處理同PC組。分別觀察各組缺血前及再灌注30 min時(shí)左心功能變化情況:LVSP、±dp/dtmax;并于再灌注末取同一部位心肌組織標(biāo)本,檢測心肌組織中cTnI和NO的含量,并且通過TUNEL法檢測各組心肌組織細(xì)胞凋亡情況、免疫組化方法及PCR方法檢測caveolin-3在各組心肌細(xì)胞中的表達(dá)變化情況。
　　 結(jié)果：①PC1組對大鼠平均動(dòng)脈壓無明顯影響,PC3組則明顯降低;與I/R

5、組比較,PC1組HR、LVSP、±dp/dtmax明顯升高,CF明顯增加,PC3組則明顯降低,CF明顯減少(P＜0.05),與PC3組比較,PC2組HR、LVSP、±dp/dtmax)(明顯升高,CF明顯增加(P＜0.05),但較I/R組差異無顯著性(P＞0.05);與I/R組比較,PC1組心肌組織中cTnI的含量明顯降低,NO含量明顯升高(P＜0.05);PC2組較PC1組心肌組織中cTnI及NO含量明顯升高,PC3組極明顯升高(P＜

6、0.05)；②與I/R組比較,硝酸甘油預(yù)處理組LVSP、±dp/dtmax及心肌組中NO明顯升高,cTnI明顯降低(P＜0.05),心肌凋亡細(xì)胞明顯減少(P＜0.05),免疫組化及PCR均顯示caveolin-3的表達(dá)水平明顯增加(P＜0.05);M組與I/R組比較,差異無顯著性。
　　 結(jié)論：NO供體對缺血再灌注心肌的作用與劑量有關(guān):靜脈持續(xù)1 h泵入小劑量硝酸甘油[2μg/(kg·min)]對大鼠血流動(dòng)力學(xué)無明顯影響,但卻明