附子對(duì)病證動(dòng)物模型基礎(chǔ)毒性作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究生附子、黑順片及白附片對(duì)多種病證動(dòng)物模型的基礎(chǔ)毒性，揭示煎煮時(shí)間、給藥劑量、炮制及病證動(dòng)物模型與附子毒性的相關(guān)性，探索病證動(dòng)物模型在中藥毒理學(xué)研究中的應(yīng)用方法。 方法：根據(jù)附子的臨床功效與主治，在SPF實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障系統(tǒng)環(huán)境下，選用SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物建立疼痛、炎癥、脾陽(yáng)虛證及腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型，研究生附子、黑順片及白附片煎煮15min、30min、1h、2h、3h、4h、6h對(duì)各病證動(dòng)物模型的急性毒性，并結(jié)合應(yīng)用均勻設(shè)計(jì)

2、和回歸分析方法，研究生附子煎煮15min、30min、1h、2h、3h、4h、6h分別配以臨床劑量的72倍、12倍、120倍、48倍、6倍、96倍、24倍給藥對(duì)虛寒證動(dòng)物模型的長(zhǎng)期毒性。 結(jié)果： 1、附子對(duì)病證動(dòng)物模型急性毒性研究結(jié)果：(1)生附子1 5min—4h水煎液對(duì)模型動(dòng)物急性毒性觀察，疼痛、炎癥、脾陽(yáng)虛證及腎陽(yáng)虛證模型小鼠均出現(xiàn)呃逆、運(yùn)動(dòng)麻痹、流涎、腹瀉、昏睡、抽搐等中毒癥狀，測(cè)出其半數(shù)致死量(LD<，50>)

3、分別在19.11—71.33、19.11—65.25、18.62—64.59、19.63—71.78、20.60—72.99及19.14—71.78g生藥／kg之間；生附子6h水煎液對(duì)模型動(dòng)物急性毒性觀察，各證型小鼠均出現(xiàn)嗜睡、觸痛覺(jué)減退等輕微的中毒癥狀，不能測(cè)出LD<,50>，測(cè)出最大耐受量(MTD)均為240g／kg。(2)黑順片15min—6h水煎液、白附片15min—6h水煎液對(duì)模型動(dòng)物急性毒性觀察，各證型小鼠均出現(xiàn)嗜睡、觸痛覺(jué)

4、減退等輕微的急性中毒癥狀，不能測(cè)出LD<,50>，測(cè)出MTD分別在240—312g生藥／kg與240—336g生藥／kg之間。(3)生附子6h水煎液、黑順片15min—6h水煎液及白附片15min—6h水煎液均能明顯延長(zhǎng)模型小鼠的扭體反應(yīng)潛伏期，減少扭體次數(shù)，延長(zhǎng)熱板痛閾反應(yīng)潛伏期，降低耳殼腫脹率，降低肉芽腫干重，增加脾、腎陽(yáng)虛證小鼠體重，升高體溫及延長(zhǎng)游泳時(shí)間趨勢(shì)。 2、生附子對(duì)虛寒證動(dòng)物模型長(zhǎng)期毒性研究結(jié)果：(1)生

5、附子給藥30天觀察，15min組、lh組大鼠出現(xiàn)嗜睡、唇目紅赤、流涎、觸痛覺(jué)減退等較為明顯的中毒癥狀；15min組、2h組和3h組動(dòng)物血BUN明顯升高，15min組、1h組和4h組大鼠腦臟器系數(shù)明顯增大，15min組、30min組個(gè)別大鼠肝臟、腎臟有輕度病理?yè)p傷；各給藥組動(dòng)物體重、體溫、腹圍指數(shù)、自發(fā)活動(dòng)次數(shù)等較模型組均有不同程度升高。(2)生附子停藥15天可逆性觀察，各給藥組動(dòng)物中毒癥狀消失，體重、體溫、自發(fā)活動(dòng)次數(shù)逐漸回升，15mi

6、n組、1h組、4h組及6h組動(dòng)物腦臟器系數(shù)明顯增高，15min組、1h組動(dòng)物血BUN明顯增高或有增高趨勢(shì)。(3)經(jīng)回歸分析表明，生附子對(duì)模型大鼠毒性和藥效發(fā)揮最大的煎煮時(shí)間和給藥劑量理論最佳配比均為30min、120倍。 結(jié)論： 1、生附子15min—4h水煎液對(duì)各病證動(dòng)物模型具有明顯的急性毒性作用，主要表現(xiàn)為神經(jīng)系統(tǒng)、心臟及胃腸等毒性反應(yīng)。生附子6h、黑順片15min—6h及白附片15min—6h水

7、煎液對(duì)各病證動(dòng)物模型具有輕微的急性毒性作用，主要表現(xiàn)為神經(jīng)系統(tǒng)毒性反應(yīng)。生附子、黑順片與白附片中毒劑量對(duì)不同病證動(dòng)物模型具有鎮(zhèn)痛、抗炎、溫補(bǔ)脾腎及改善虛寒證候的作用。 2、生附子對(duì)虛寒證動(dòng)物模型具有一定的神經(jīng)系統(tǒng)、心臟及肝腎毒性，尤以15min組(臨床劑量72倍)、lh(臨床劑量120倍)組動(dòng)物癥狀顯著，生附子長(zhǎng)期毒性作用最大的煎煮時(shí)間、給藥劑量的理論最佳配比為30min、120倍；生附子具有改善模型動(dòng)物虛寒證候的作用，其藥效發(fā)

8、揮最大的煎煮時(shí)間、給藥劑量的理論最佳配比為30min、120倍。 3、研究結(jié)果表明，附子基礎(chǔ)毒性作用大小與模型動(dòng)物證候類(lèi)型密切相關(guān)，提示病證動(dòng)物模型在附子毒性研究中具有重要意義，病證動(dòng)物模型方法在中藥毒理學(xué)研究中值得探索運(yùn)用。不同煎煮時(shí)間、給藥劑量及炮制方法的附子對(duì)病證動(dòng)物模型基礎(chǔ)毒性的大小也存在較大的差異，提示在附子毒性研究中應(yīng)注意綜合因素的影響。生附子長(zhǎng)期毒性與藥效發(fā)揮最大的煎煮時(shí)間、給藥劑量的理論最佳配比均為30min、1