金佛山雪膽的化學(xué)成分及生物活性研究.pdf

1、雪膽（Hemsleya amabilis）屬于葫蘆目葫蘆科（Cucurbitaceae）雪膽屬（Hemsleya Cogn）植物，主產(chǎn)于亞洲亞熱帶至溫帶地區(qū)。金佛山雪膽含有四環(huán)三萜類和五環(huán)三萜類化合物，具有清熱解毒、抗菌消炎等多種功效，以治療菌痢、腸炎、支氣管炎及急性扁桃體炎等應(yīng)用于臨床。
　　目的：1)對(duì)金佛山雪膽（Hemsleya pengxianensis var. jinfushanensis）進(jìn)行化學(xué)成分的分離與鑒定。<

2、br>　　2)對(duì)分離所得雪膽單體化合物進(jìn)行多種癌細(xì)胞的細(xì)胞毒活性篩選。
　　3)對(duì)所有單體化合物進(jìn)行斑馬魚新生血管抑制試驗(yàn)，探索其抗腫瘤機(jī)制。
　　方法：采用色譜技術(shù)（硅膠柱色譜、凝膠柱色譜、反相柱色譜、制備HPLC色譜）、重結(jié)晶等手段，對(duì)雪膽乙酸乙酯部位和正丁醇部位進(jìn)行化學(xué)成分研究，通過(guò)運(yùn)用紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜、核磁共振波譜等技術(shù)對(duì)分離所得的單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定；應(yīng)用MTT法對(duì)分離得到的單體化合物進(jìn)行H460(人肺腺

3、癌)、DU145(人前列腺癌)、SW620(人結(jié)腸癌)細(xì)胞毒活性篩選；應(yīng)用轉(zhuǎn)基因（trangenosis，TG）血管熒光斑馬魚（VEGFR2:GFP）作為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛣?dòng)物，通過(guò)普通顯微鏡及熒光顯微鏡檢測(cè)不同劑量金佛山雪膽單體化合物影響斑馬魚胚胎背部節(jié)間血管（intersegment vessels，ISV）的生成情況。
　　結(jié)果：從金佛山雪膽中共分離得到26個(gè)化合物。分別鑒定為：Hemslepencins A(1)、Hemslepen

4、cins B(2)、Hemslepencins C(3)、Hemslepencins D(4)、16,25-乙?；J素F(5)、Hemslepenside B(6)、Hemslepenside C(7)、Hemslepenside D(8)、Hemslepenside E(9)、Hemslepenside F(10)、Hemslepenside G(11)、Hemslepenside H(12)、Hemslepenside I(13)

5、、3β-hydroxycucurbita-5,24-diene-11-one-26-methy-27-O-β-D-glucopyranosyl(1?6)-β-D-gluc opyranoside(14)、3β,11,26-trihydroxycucurbita-5,24-dien-26-O-β-D-glucopyranosyl(1?6)-β-D-glucopyranoside(15)、雪膽素G(16)、Hexanorcucurbitac

6、in F(17)、Scandenogenin A(18)、16，25-二乙酰基-23,24-二氫葫蘆素F(19)、雪膽甲素苷(20)、jinfushanosides B(21)、jinfushanosides G(22)、短柄雪膽皂苷 D(23)、Carnosifloside I(24)、jinfushanosides C(25)、jinfushanosides D(26)。對(duì)其中含量較多的化合物進(jìn)行細(xì)胞毒活性篩選，結(jié)果表明新化合物5,

7、6,7,8細(xì)胞毒活性強(qiáng)且抑制作用呈濃度依賴性。對(duì)所有單體化合物進(jìn)行斑馬魚新生血管抑制試驗(yàn)，篩選得到化合物2,3,5,6,8,10,19的中、高劑量組出現(xiàn)熒光缺失、血管變細(xì)、部分缺失，對(duì)斑馬魚新生血管有一定的抑制作用。
　　結(jié)論：共分得化合物26個(gè)，其中新化合物13個(gè)，已知化合物12個(gè),首次從自然界中分到的化合物1個(gè)?；衔?,6,7,8對(duì)H460(人肺腺癌)、DU145(人前列腺癌)、SW-620(人結(jié)腸癌)均有較強(qiáng)的細(xì)胞毒活性。