肝素殼聚糖自組裝表面修飾小口徑滌綸人工血管的研究.pdf

1、隨著人口老齡化和飲食結(jié)構(gòu)的改變，動脈硬化閉塞性疾病的發(fā)病率逐年升高，臨床上對中小口徑人工血管的需求量很大。目前在臨床上使用血管移植物主要有兩類：1)自體血管移植物如內(nèi)乳動脈、橈動脈和大隱靜脈：但是來源有限；2)人工合成材料血管：目前臨床上使用最廣泛的血管替代物仍舊是人工血管。因此，通過對人工材料血管進行改性與修飾，進一步提高其遠期通暢率成為研究重點。本實驗通過對針織滌綸人工血管進行肝素和殼聚糖自組裝表面修飾和生物相容性測試，并將該人工血

2、管按照國標進行力學(xué)性能測試，最后將人工血管置換實驗犬腹主動脈，術(shù)后行彩色多普勒超聲和MRI血管造影(MR angiography，MRA)隨訪移植血管血流通暢度和吻合口內(nèi)膜增生程度，并于術(shù)后分節(jié)點取出移植的血管行掃描電鏡、組織學(xué)和免疫組織化學(xué)檢測以了解置換的小口徑血管移植物在體內(nèi)的情況，來評價肝素殼聚糖表面修飾小口徑人工血管的運用可行性。
　　 第一部分肝素殼聚糖層層自組裝滌綸人工血管的制備及生物相容性測試
　　 目的：

3、制備肝素殼聚糖表面修飾小口徑滌綸人工血管，并對該表面修飾后的人工血管進行生物相容性測試。
　　 方法：采用層層自組裝技術(shù)對滌綸人工血管進行肝素殼聚糖表面修飾。參照GB/T16886.4/ISO10993-4，GB/T16886.5/ISO10993-5對修飾后的滌綸人工血管進行細胞粘附試驗、MTS細胞毒性試驗、LDH釋放試驗、急性毒性試驗、短期皮下植入實驗、直接接觸溶血試驗、間接接觸溶血試驗、血小板粘附試驗。
　　 結(jié)果

4、：利用層層自組裝技術(shù)成功制備肝素殼聚糖表面修飾滌綸人工血管。掃描電鏡顯示其微觀結(jié)構(gòu)沒有在表面處理中受到破壞。細胞粘附試驗提示人臍靜脈內(nèi)皮細胞株ECV304和小鼠成纖維細胞株L929在修飾后滌綸人工血管表面粘附生長良好；MTS細胞毒性試驗和LDH釋放試驗提示肝素殼聚糖層層自組裝滌綸人工血管較陰性對照無明顯差異(P>0.05)；急性毒性試驗實驗組無小鼠死亡，較陰性對照組無明顯差異；短期皮下植入實驗提示修飾后人工血管周圍組織炎癥反應(yīng)較未處理滌

5、綸人工血管無明顯區(qū)別；直接和間接接觸溶血試驗提示修飾后滌綸人工血管無明顯破壞紅細胞作用；血小板粘附提示肝素殼聚糖層層自組裝人工血管抗血小板粘附、抗凝血性能優(yōu)于未處理滌綸血管。
　　 結(jié)論：肝素殼聚糖層層自組裝技術(shù)對滌綸人工血管進行表面處理切實可行，并且對滌綸人工血管的生物相容性未產(chǎn)生不良的影響。
　　 第二部分肝素殼聚糖自組裝表面修飾小口徑滌綸人工血管的力學(xué)性能測試
　　 目的：評估肝素殼聚糖自組裝表面修飾對滌綸

6、人工血管力學(xué)性能的影響。
　　 方法：根據(jù)中國醫(yī)藥行業(yè)標準YY0550-2004/ISO7198:1998對其壁厚、自然狀態(tài)下內(nèi)徑、加壓后內(nèi)徑、軸向拉伸強度、最大縫持張力、吻合口爆破壓、人工血管孔隙率、水滲透性進行測試。
　　 結(jié)果：肝素殼聚糖自組裝表面修飾對滌綸人工血管力學(xué)性能符合人體使用標準。對比未修飾人工血管，肝素殼聚糖自組裝表面修飾對滌綸人工血管壁厚、自然狀態(tài)下內(nèi)徑、加壓后內(nèi)徑、軸向拉伸強度、最大縫持張力、吻合口

7、爆破壓、人工血管孔隙率、水滲透性無顯著差異。
　　 結(jié)論：肝素殼聚糖自組裝表面修飾對滌綸人工血管力學(xué)性能無明顯影響，肝素殼聚糖自組裝表面修飾滌綸人工血管力學(xué)性能符合人體使用標準。
　　 第三部分肝素殼聚糖自組裝表面修飾小口徑滌綸人工血管的動物實驗
　　 目的：肝素殼聚糖層層自組裝表面修飾小口徑滌綸人工血管在體內(nèi)血流動力條件下血管壁組織結(jié)構(gòu)重塑過程。
　　 方法：將肝素殼聚糖層層自組裝表面修飾小口徑滌綸人工

8、血管置換6只實驗犬自體腹主動脈，對照組為未經(jīng)表面處理的同口徑人工血管手術(shù)置換6只實驗犬。于術(shù)后4w、8w、12w行影像學(xué)檢查、組織學(xué)和免疫組織化學(xué)檢測，以及掃描電鏡檢查以評價移植物血管在體內(nèi)重塑情況。
　　 結(jié)果：6根肝素殼聚糖層層自組裝表面修飾小口徑滌綸人工血均通暢；對照組1只實驗犬死亡，術(shù)后4w彩超和MRA提示1根人工血管阻塞。6根實驗組通暢的血管在術(shù)后不同時點取出發(fā)現(xiàn)內(nèi)表面菲薄、光滑。血管壁內(nèi)表面覆蓋一連續(xù)、鵝卵石樣單層細

9、胞，該細胞Ⅷ因子相關(guān)抗原抗體染色陽性。這種移植于體內(nèi)的小_口徑血管移植物于術(shù)后4w時新生動脈壁厚度約為900μm，并于管壁中層可見較多血管SMC和外膜層主要為成纖維細胞，而且最早于術(shù)后4w時在血管壁中層就可見彈力纖維。
　　 結(jié)論：肝素殼聚糖層層自組裝表面修飾中小口徑滌綸人工血管在體內(nèi)血流動力條件下能在體內(nèi)完成內(nèi)皮化，具有較高的近中期通暢率，并參與透壁性內(nèi)皮化的進程。
　　 全文結(jié)論：
　　 1.肝素殼聚糖層層自