姜黃素抗癲癇作用及機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：探討姜黃素抗癲癇作用及其可能的作用機(jī)制。方法：(1)建立匹羅卡品誘導(dǎo)癲癇大鼠模型,觀察姜黃素干預(yù)對(duì)癲癇動(dòng)物模型行為學(xué)影響;(2)利用爪蟾卵母細(xì)胞內(nèi)源性Na/K-ATPase及外源基因表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)大鼠Na/K-ATPase、EAAC1及GAT1蛋白,借助雙電極電壓鉗技術(shù),應(yīng)用姜黃素干預(yù),實(shí)時(shí)記錄并觀察姜黃素干預(yù)對(duì)不同離子轉(zhuǎn)運(yùn)體介導(dǎo)穩(wěn)態(tài)電流的影響。結(jié)果：(1)姜黃素干預(yù)組大鼠匹羅卡品致癇后不同時(shí)間點(diǎn)死亡率降低;癲癇發(fā)作潛伏期延長(zhǎng);達(dá)到

2、癲癇持續(xù)狀態(tài)時(shí)間顯著延長(zhǎng);(2)不同濃度梯度姜黃素(7.5uM,15uM,30uM,75uM)灌流對(duì)內(nèi)源性及外源性Na/K-ATPase介導(dǎo)穩(wěn)態(tài)電流,未有顯著影響;不同濃度姜黃素(15uM,30uM,)預(yù)處理卵母細(xì)胞24小時(shí),亦未觀察到明顯效應(yīng);借助微量注射方法,將姜黃素(30uM)直接注射到卵母細(xì)胞內(nèi),對(duì)Na/K-ATPase介導(dǎo)電流仍然沒(méi)有顯著影響。(3)30uM姜黃素灌流對(duì)外源性EAAC1介導(dǎo)穩(wěn)態(tài)電流沒(méi)有明顯影響。(4)30uM姜

3、黃素灌流可以輕度抑制外源性GAT1介導(dǎo)穩(wěn)態(tài)電流。結(jié)論：(1)姜黃素干預(yù)能夠降低匹羅卡品致癇后大鼠死亡率;延長(zhǎng)癲癇發(fā)作潛伏期;延長(zhǎng)達(dá)到癲癇持續(xù)狀態(tài)時(shí)間;(2)姜黃素對(duì)細(xì)胞膜Na/K-ATPase和EAAC1介導(dǎo)穩(wěn)態(tài)電流沒(méi)有顯著影響,對(duì)GAT1介導(dǎo)穩(wěn)態(tài)電流有輕度抑制作用。
　　 本文共分為兩部分,第一部分是利用匹羅卡品致癇大鼠模型,探討姜黃素抗癲癇作用。第二部分為爪蟾卵母細(xì)胞異源蛋白表達(dá)模型的建立及雙電極電壓鉗技術(shù)的應(yīng)用;通過(guò)上述技