?；撬嵩卺槾炭拱d癇中的作用及其機(jī)制初探.pdf

1、癲癇是神經(jīng)系統(tǒng)常見病，患病率在4％0左右，對人類健康危害極大。許多頑固性癲癇對藥物呈不應(yīng)性。探索安全有效的抗癇措施，是一個世界性的難題之一。長期以來，中醫(yī)應(yīng)用針刺可以有效的治療癲癇。近年來的臨床和實驗研究也證實針刺可有效的抑制癲癇發(fā)作，但其具體機(jī)制尚不十分清楚。本實驗室以往的工作對針刺治療癲癇的效果以及和腦內(nèi)谷氨酸(glutamate，Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、內(nèi)阿片肽、一氧化氮的關(guān)系進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究。本工作在海人藻酸致癲

2、癇模型上，探討電針抗癲癇與?；撬岬年P(guān)系及其可能的機(jī)制。 1. 電針可以有效的抑制癲癇發(fā)作 側(cè)腦室注射0．5ug，0．7μg，1．0μg的海人藻酸(kainicacid，KA)均可以誘發(fā)大鼠癲癇樣行為發(fā)作，并且隨著注射劑量的加大，癲癇樣行為發(fā)作的強(qiáng)度增加。我們選用0．7μgKA建立大鼠癲癇模型，注射后2小時時記錄的大鼠腦電與注射前相比，腦電的頻率與幅度明顯增大，腦電功率譜幅度增大，頻譜右移，總功率增大。 電針“人中

3、”(DU26)，“涌泉”(K1)穴位可以明顯的降低大鼠的癲癇樣行為發(fā)作級別。焦油紫(cresylviolet，CV)染色顯示，KA致癇后，可引起同側(cè)及對側(cè)海馬CA3區(qū)神經(jīng)元死亡，與KA組相比，電針治療可以減輕同側(cè)及對側(cè)海馬CA3區(qū)神經(jīng)元死亡程度。微透析結(jié)合高效液相色譜實驗檢測海馬CA3區(qū)細(xì)胞外氨基酸類遞質(zhì)變化情況，結(jié)果顯示與對照組相比，ICA致癇后，細(xì)胞外谷氨酸水平明顯降低，牛磺酸(taurine，Tau)水平無明顯變化；與KA組相比，

4、電針治療后可以明顯上調(diào)細(xì)胞外Glu和Tau水平。 逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscription-polymerasechainreaction，RT-PCR)實驗結(jié)果顯示與對照組相比，致癇后6小時，海馬?；撬徂D(zhuǎn)運(yùn)體(taurinetransporter，Taut)基因的mRNA水平明顯下調(diào)(p<0．05)，半胱氨酸磺酸脫羧酶(cysteinesulfinatedecarboxylase，CSD)和半胱氨酸二氧化

5、酶(cysteinedioxygenase，CDO)基因的mRNA水平有下調(diào)的趨勢，但差別無統(tǒng)計學(xué)意義；與KA組相比，電針組(electro—acupuncture，EA)Taut，CSD基因的mRNA水平明顯上調(diào)(p<0．05)，CDO基因的mRNA水平有上調(diào)的趨勢，但差別無統(tǒng)計學(xué)意義。致癇后24h，對照組，KA組，隊組之間的Taut，CSD，CDO基因的mRNA水平無顯著性差異。免疫組織化學(xué)染色顯示，與對照組相比，KA致癇后，同側(cè)及

6、對側(cè)海馬CA3區(qū)Taut基因的蛋白水平有下調(diào)的趨勢；與KA組相比，電針治療后可以明顯上調(diào)同側(cè)及對側(cè)海馬CA3區(qū)Taut基因的蛋白水平。 2．?；撬嵯目稍黾哟笫蟮陌d癇敏感性并減弱電針的抗癇作用 微透析結(jié)合高效液相色譜實驗結(jié)果顯示，與對照組相比，給予含3％B一丙氨酸(β—alanine，beta-alanine，B—ala，beta-ala)的飲水10天，可以有效的消耗大鼠皮層，海馬，紋狀體，小腦組織內(nèi)的?；撬?，降低海馬和

7、紋狀體組織內(nèi)的Glu／GABA濃度比，并且不影響大鼠的體重。大鼠海馬CA3區(qū)細(xì)胞外的Glu／GABA濃度比有增加的趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義。與對照組相比，給予含3％beta-ala的飲水3周，可以有效的消耗大鼠皮層，海馬，紋狀體組織內(nèi)的?；撬崴?，對小腦組織內(nèi)的牛磺酸水平無顯著影響，但影響大鼠的體重增加。 在?；撬嵯哪Ｐ偷幕A(chǔ)上，側(cè)腦室給予0．7ugKA可以誘發(fā)大鼠癲癇樣行為發(fā)作，且與KA組相比，大鼠的發(fā)作敏感性增加；電針可以明顯

8、抑制在牛磺酸消耗模型的基礎(chǔ)上給予KA誘發(fā)的大鼠癲癇樣行為發(fā)作，但電針的這種抑制作用，與電針對在正常大鼠上給予KA誘發(fā)的大鼠癲癇樣行為發(fā)作的抑制作用相比，明顯減弱。在牛磺酸消耗模型的基礎(chǔ)上，給予0．7μgKA(beta-ala+KA)，可以引起同側(cè)及對側(cè)海馬CA3區(qū)神經(jīng)元死亡；與beta-ala+KA組相比，電針治療(beta-ala+KA+EA)可以減輕同側(cè)及對側(cè)海馬CA3區(qū)神經(jīng)元死亡程度。 在牛磺酸消耗模型的基礎(chǔ)上，給予0．7

9、ugKA誘發(fā)大鼠癲癇樣行為發(fā)作后6小時，與對照組相比，海馬Taut基因的mRNA水平無顯著變化，CSD基因的mRNA水平明顯下調(diào)(p

10、的趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義；電針治療后，與beta—ala+KA組相比，海馬Taut，CSD，CDO基因的mRNA水平有上調(diào)的趨勢，但均無統(tǒng)計學(xué)意義。免疫組織化學(xué)染色顯示，與對照組相比，beta—ala+KA組大鼠的兩側(cè)海馬的CA3，齒狀回區(qū)Taut基因的蛋白水平明顯下調(diào)；電針治療后，與beta-ala+KA組相比，大鼠的兩側(cè)海馬的CA3，齒狀回區(qū)Taut基因的蛋白水平上調(diào)。 綜上所述，電針具有抑制癲癇發(fā)作的作用。?；撬釁⑴c了電針抗