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1、目的:制備PLGA包裹Gd-DTPA微球的MRI對(duì)比劑,重點(diǎn)研究其弛豫性能、體外釋放規(guī)律,對(duì)制備工藝進(jìn)行優(yōu)化。為MR分子影像學(xué)探針制備打下研究基礎(chǔ)。
方法:⑴采用乳化溶劑揮發(fā)法(水/油/水,W/O/W)制備PLGA包裹Gd-DTPA微球,用普通光學(xué)顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察Gd-PLGA微球的形態(tài);采用激光粒徑儀測(cè)定其大小;建立HPLC法測(cè)定Gd-DTPA含量的方法,然后采用離心法測(cè)出Gd-PLGA微球包封率;采用MRI掃
2、描儀測(cè)定其T1弛豫時(shí)間,計(jì)算出Gd-PLGA微球的R1弛豫性能;在PBS液和雙蒸水環(huán)境模擬Gd-PLGA微球內(nèi)Gd-DTPA的體外釋放規(guī)律。⑵以包封率為主要考察指標(biāo)對(duì)超聲震蕩儀的聲震時(shí)間、高速均質(zhì)分散機(jī)的轉(zhuǎn)速、內(nèi)水相Gd-DTPA加入量及濃度、外水相PVA濃度等四個(gè)因素進(jìn)行單因素和多因素正交實(shí)驗(yàn)對(duì)微球的制備進(jìn)行優(yōu)化。
結(jié)果:①光學(xué)顯微鏡下微球呈球形,表面光滑,形態(tài)規(guī)則,大小較均一,微球間無(wú)聚集和粘連,激光粒徑儀測(cè)得微球的粒
3、徑平均值2.75μm。透射電子顯微鏡下Gd-PLGA微球呈球形,表面光滑,形態(tài)規(guī)則,其內(nèi)見(jiàn)電子致密物聚集,空白PLGA微球電子致密物較少。通過(guò)HPLC法測(cè)定出被包裹的Gd-DTPA的量為15.00mg,總投入的量為46.90mg,計(jì)算出包封率為31.99%。微球體外釋放研究發(fā)現(xiàn)雙蒸水組釋放的量多于PBS組但組間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.09),兩組的單位時(shí)間累計(jì)釋放曲線形態(tài)相似。②對(duì)超聲震蕩儀的聲震時(shí)間、均質(zhì)分散機(jī)轉(zhuǎn)速、外水相、內(nèi)水相
4、四個(gè)因素進(jìn)行單因素和多因素正交實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)微球包封率影響最大的因素為超聲震蕩儀的聲震時(shí)間,其次為均質(zhì)分散機(jī)轉(zhuǎn)速,內(nèi)水相次之,外水相更次之。通過(guò)多因素正交試驗(yàn)得出最佳的制備條件為聲震時(shí)間60 s,均質(zhì)分散機(jī)轉(zhuǎn)速10000 rpm,內(nèi)水相0.2ml濃度234.5mg/ml的Gd-DTPA,外水相2%PVA、4%Nacl的混合液。
結(jié)論:⑴采用水/油/水乳化溶劑揮發(fā)法成功制得Gd-PLGA微球,并對(duì)其基本性質(zhì)做了研究。該方法比其他
5、制備方法更加簡(jiǎn)便,制備所得Gd-PLGA微球的形態(tài)等物理性質(zhì)較好。研究發(fā)現(xiàn)Gd-DTPA被PLGA包裹后其弛豫率下降,與其他制備方式相比較弛豫率的下降沒(méi)有那么顯著。微球的體外釋放研究表明Gd-PLGA微球具有其它PLGA微球體系相似的釋放規(guī)律,改變釋放環(huán)境,單位時(shí)間累計(jì)釋放曲線的形態(tài)相似,但單位時(shí)間內(nèi)的釋放量有較顯著的影響。⑵本研究對(duì)超聲震蕩儀的聲震時(shí)間、均質(zhì)分散機(jī)轉(zhuǎn)速、內(nèi)水相、外水相等四個(gè)因素進(jìn)行單因素和多因素正交實(shí)驗(yàn)成功的提高Gd-
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