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1、目的:開發(fā)針對(duì)輻射損傷人員的小型基因芯片,對(duì)X射線照射人外周血淋巴細(xì)胞后的基因表達(dá)進(jìn)行了分析和驗(yàn)證,為探究不同劑量輻射的分子作用機(jī)制和優(yōu)化生物劑量計(jì)提供了進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
方法:1.以50種輻射敏感基因作為基礎(chǔ),研制了一種小型基因芯片。2.分別采用輻射劑量為0.1Gy、0.5Gy、2Gy的X射線照射人外周血淋巴細(xì)胞。3.照射后4小時(shí)及20小時(shí),用自主研制的基因芯片檢測(cè)淋巴細(xì)胞基因表達(dá)譜的改變,芯片表達(dá)譜數(shù)據(jù)通過NimbleSc
2、an軟件分析,選擇差異表達(dá)≥1.5倍為輻射誘導(dǎo)反應(yīng)基因。4.利用GO方法分析篩選出的部分輻射反應(yīng)基因的生物學(xué)功能。
結(jié)果:1.利用基因芯片技術(shù)研究X射線照射人外周血淋巴細(xì)胞4h后,0.1Gy組基因XPC表達(dá)上調(diào),SSBP2表達(dá)下調(diào);0.5Gy組基因BBC、GADD45A、IER5、XPC表達(dá)上調(diào), SSBP2、CCT5表達(dá)下調(diào);2Gy組基因BBC、CDKN1A、GADD45A、IER5、TP53I3、XRCC5、XPC表達(dá)上調(diào)
3、,CCT5、SSBP2表達(dá)下調(diào)。照射20h后,0.5Gy組BAX、BBC3、TP53I3、XPC表達(dá)上調(diào),CCT5、PCNA表達(dá)下調(diào);2Gy組BBC3、CDKN1A、TP53I3、XRCC5、XPC上調(diào),CCT5、PCNA表達(dá)下調(diào)。2.利用GO分析得出,低劑量輻射誘導(dǎo)產(chǎn)生的基因主要參與細(xì)胞間信號(hào)通路、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞/組織防御、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定等過程,而高劑量誘導(dǎo)產(chǎn)生的基因主要參與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期阻滯等過程。
結(jié)論:1.小
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