胡椒科植物大葉蒟鎮(zhèn)痛、抗抑郁、抗焦慮和毒性研究.pdf

1、大葉蒟(Piper laetispicum C.DC)屬胡椒科胡椒屬植物,為我國傣民族藥,民間稱小腸風,山胡椒,野胡椒,傣語稱其干燥莖藤為“嘿沙干”,在西雙版納民間用于治療心胃氣痛、腹痛、腹瀉、嘔吐和消化不良等癥,用時將莖藤切碎嚼服或用涼水沖服立止。本品同屬多種植物的莖藤在東南亞國家民間廣為藥用。
　　 在本課題組前期的藥效篩選過程中,發(fā)現(xiàn)大葉蒟具有潛在的鎮(zhèn)痛和抗抑郁的活性?；诒菊n題組的前期研究結(jié)果和大葉藥在民間的藥用價值,本

2、文詳細探討大葉藥鎮(zhèn)痛,抗抑郁,抗焦慮活性及可能的作用機制;同時對大葉蒟的毒性也做了初步研究。
　　 藥理活性和作用機制的研究主要采用經(jīng)典的動物行為學模型。
　　 鎮(zhèn)痛抗炎活性的研究采用醋酸扭體法、福爾馬林致痛法、熱板法、縮尾法和二甲苯致炎法,對揮發(fā)油、醇提取物、各個不同極性萃取部位以及大葉蒟素和芝麻素的鎮(zhèn)痛活性進行評定。運用納洛酮拮抗的方法測定阿片受體是否參與大葉蒟的鎮(zhèn)痛作用。
　　 結(jié)果:
　　 1.大

3、葉蒟不同營養(yǎng)器官的揮發(fā)油具有鎮(zhèn)痛作用,其鎮(zhèn)痛作用的強弱與揮發(fā)油中所含的倍半萜的含量呈正相關性,主要作用部位為外周鎮(zhèn)痛。
　　 2.大葉藥的95％乙醇提取物有鎮(zhèn)痛活性,其鎮(zhèn)痛作用部位為外周和中樞,但是外周作用明顯強于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的鎮(zhèn)痛。
　　 3.在大葉蒟各個萃取相中,石油醚相和氯仿相均有鎮(zhèn)痛作用,但是乙酸乙酯相的鎮(zhèn)痛作用不明顯;然而在抗炎方面,石油醚相,氯仿相,乙酸乙酯相均有顯著活性。
　　 4.大葉蒟素和芝麻素

4、均有很好的鎮(zhèn)痛效果。大葉藥素具有很好的中樞鎮(zhèn)痛作用,該鎮(zhèn)痛作用不受阿片受體拮抗劑納洛酮的拮抗,說明阿片受體并不參與大葉蒟素的中樞鎮(zhèn)痛作用;而芝麻素的作用部位主要為外周鎮(zhèn)痛。
　　 結(jié)論:
　　 1.在大葉蒟的揮發(fā)油中,倍半萜類化合物是大葉蒟鎮(zhèn)痛作用的主要物質(zhì)基礎。在去除揮發(fā)油的提取物中,酰胺類生物堿和木脂素類化合物是主要的活性成分,而且倍半萜類化合物和酰胺類生物堿或木脂素類化合物可能有協(xié)同鎮(zhèn)痛作用。
　　 2.粗

5、提物,各萃取部位都顯示了較強的外周鎮(zhèn)痛抗炎作用。
　　 3.大葉蒟素和芝麻素是有機相中兩個主要單體化合物。大葉蒟素具有明顯的中樞鎮(zhèn)痛作用,阿片受體并不參與大葉藥素的鎮(zhèn)痛機制。芝麻素的外周鎮(zhèn)痛作用強于中樞鎮(zhèn)痛。
　　 抗抑郁活性的研究采用小鼠強迫游泳法和小鼠懸尾法,對大葉藥95％乙醇提取物,各個萃取相,大葉藥素和大葉蒟素衍生物的抗抑郁活性進行評定,并用納洛酮,精氨酸和PCPA驗證阿片受體、NO通路和5-HT系統(tǒng)是否參與大葉

6、蒟素抗抑郁作用。
　　 結(jié)果:
　　 1.大葉蒟95％乙醇提取物120,240和480mg/kg在急性給藥和亞長期給藥的情況下都顯示很好的抗抑郁活性。
　　 2.各個萃取相的抗抑郁結(jié)果顯示:石油醚部位,氯仿部位,乙酸乙酯部位都有抗抑郁活性,相比較而言,石油醚部位和氯仿部位的抗抑郁活性明顯強于乙酸乙酯部位;在三個有效部位的作用機制研究過程中,只有氯仿部位的抗抑郁機制與五羥色胺系統(tǒng)有關。
　　 3.大葉蒟素的

7、抗抑郁活性在小鼠強迫游泳和小鼠懸尾試驗中都呈明顯的線性量效關系,機制研究顯示阿片受體,和五羥色胺系統(tǒng)不參與大葉蒟素的抗抑郁作用,但一氧化氮通路至少部分參與大葉蒟素的抗抑郁作用。
　　 4.運用小鼠強迫游泳對16個大葉蒟素衍生物的抗抑郁活性進行初篩,急性給藥結(jié)果顯示ysy-5,ysy-7,ysy-10,ysy-11,ysy-12,ysy-16具顯著抗抑郁活性;七天給藥結(jié)果顯示ysy-5,ysy-7,ysy-10和ysy-16顯示了

8、抗抑郁活性。
　　 結(jié)論:
　　 1.大葉蒟乙醇提取物具有抗抑郁作用,且亞長期給藥后,動物不出現(xiàn)耐藥性。
　　 2.五羥色胺系統(tǒng)不參與石油醚部位和乙酸乙酯部位的抗抑郁作用,而部分參與氯仿部位的抗抑郁作用。
　　 3.五羥色胺系統(tǒng),阿片受體不參與大葉藥素的抗抑郁作用;一氧化氮通路至少部分參與大葉蒟素的抗抑郁作用。
　　 4.大葉蒟素的衍生物中,ysy-5,ysy-7,ysy-10,ysy-16具有較

9、好的抗抑郁活性,提示我們大葉蒟衍生物中的構(gòu)效關系。
　　 5.各個萃取部位,大葉蒟素,大葉藥素衍生物的作用機制還需進一步研究。
　　 抗焦慮作用的研究采用經(jīng)典的明暗箱選擇試驗、高架迷宮試驗和孔板實驗。小鼠自主行為的評價運用開場實驗。對乙酸乙酯部位和大葉蒟素的抗焦慮活性進行評定,并運用苯二氮卓類受體拮抗劑氟馬西尼對其作用機制進行了研究。
　　 結(jié)果:
　　 1.大葉藥乙酸乙酯部位和大葉蒟素均有抗焦慮作用。<

10、br>　　 2.乙酸乙酯部位用240mg/kg給藥時出現(xiàn)較為明顯的抗焦慮作用。
　　 3.在給定的劑量范圍內(nèi),大葉蒟素抗焦慮作用的有效劑量是10mg/kg,5mg/kg和20mg/kg在所使用的三個動物模型中均沒有顯示顯著性差異。
　　 4.苯二氮卓類受體拮抗劑氟馬西尼不逆轉(zhuǎn)乙酸乙酯部位和大葉蒟素的抗焦慮作用。
　　 結(jié)論:
　　 1.乙酸乙酯部位的抗焦慮作用較弱,只有240mg/kg顯示較為明顯的抗焦

11、慮作用。
　　 2.在給定的劑量范圍內(nèi),與空白組相比,大葉蒟素的量效關系曲線呈鐘形,而不是典型的線性量效關系,其抗焦慮作用的有效劑量是10mg/kg,5mg/kg和20mg/kg沒有出現(xiàn)顯著性差異。
　　 3.苯二氮卓類受體不參與乙酸乙酯部位和大葉蒟素的抗焦慮作用。
　　 對以上三種藥理活性評價時均采用開場試驗對小鼠自主活動行為進行評定,以排除由于藥物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用引起的假陽性結(jié)果。實驗結(jié)果顯示:在三種藥理活

12、性的研究中,所有的有效劑量都不引起小鼠自主活動行為的改變,說明各個有效的給藥劑量引起的動物行為變化是特異性行為變化。
　　 在發(fā)現(xiàn)大葉蒟具有顯著藥理活性的同時,我們對大葉蒟的毒性作用也進行了初步研究。我們對大葉蒟乙酸乙酯部位的急性毒性和長期毒性進行了研究。對于長期給藥之后的動物自主行為和認知進行評定,對可能的毒性器官進行評價。
　　 結(jié)果:
　　 1.大葉蒟乙酸乙酯部位的LD50是1530mg/kg(灌胃給藥)和

13、538mg/kg(腹腔注射給藥)。
　　 2.長期毒性研究過程中,各給藥組小鼠的體重沒有明顯變化,沒有明顯異常行為,而500mg/kg組小鼠的肝臟重量顯著增加。
　　 3.經(jīng)過90天給藥,小鼠的自主行為和記憶能力沒有受到顯著影響。
　　 結(jié)論:
　　 1.乙酸乙酯部位的毒性較小。
　　 2.在長期給藥情況下,肝臟是可能的毒性靶向器官。
　　 3.長期給藥不影響自主行為和記憶能力。