凝固酶陰性葡萄球菌致病性分子標(biāo)志物的建立與應(yīng)用.pdf

1、目的：建立適用于常規(guī)檢測(cè)的致病性凝固酶陰性葡萄球菌(coagulase-negativestaphylococci，CoNS)特異性分子標(biāo)志物，評(píng)價(jià)其臨床意義。
　　 方法：本文以生物膜形成作為致病因素，采用常規(guī)生化鑒定、剛果紅試驗(yàn)、體外黏附性實(shí)驗(yàn)以及PCR等方法對(duì)臨床標(biāo)本中分離到的114株CoNS進(jìn)行表型鑒定和特異性分子標(biāo)志物的檢測(cè)。
　　 結(jié)果：
　　 1、表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌為臨床最常見(jiàn)的菌株，分別占

2、總數(shù)的41.2％及37.7％。
　　 2、剛果紅試驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果為24例，陽(yáng)性率約為21.1％。其中18例為表皮葡萄球菌，占總陽(yáng)性率的75％。
　　 3、icaD片段擴(kuò)增總陽(yáng)性率是29.0％(33/114)，表明大部分CoNS不表達(dá)胞外多糖，無(wú)致病性。
　　 4、選取12株菌(包括剛果紅試驗(yàn)陽(yáng)性PCR陰性3株，剛果紅陰性PCR陽(yáng)性3株，兩法均陽(yáng)性6株)進(jìn)行體外黏附性實(shí)驗(yàn)，其陽(yáng)性率為83.3％(10/12)，但因?qū)嶒?yàn)例

3、數(shù)較少，有待進(jìn)一步驗(yàn)證。
　　 5、37例凝固酶陰性葡萄球菌樣品進(jìn)行了16S rDNA基因及sodA基因片段的PCR擴(kuò)增，電泳檢測(cè)結(jié)果顯示全部樣品均能準(zhǔn)確地?cái)U(kuò)增出相應(yīng)的片段，其片段大小分別為16SrDNA926bp及sodA482bp，且均為單一條帶，序列測(cè)定表明所有樣品16S rDNA及sodA PCR產(chǎn)物序列均相同。
　　 結(jié)論：
　　 1、本研究首次報(bào)道了除表皮葡萄球菌以外的其他種的凝固酶陰性葡萄球菌產(chǎn)生多

4、糖胞間粘附因子的情況；
　　 2、表皮葡萄球菌在臨床CoNS中檢出最多，是攜帶icaD操縱子的主要菌種，其致病性應(yīng)引起足夠重視；
　　 3、ica操縱子可出現(xiàn)在多種CoNS中，臨床實(shí)驗(yàn)室建立并常規(guī)進(jìn)行凝固酶陰性葡萄球菌致病性的檢測(cè)是有意義、有必要的；
　　 4、16S rDNA以及sod A基因可作為鑒定CoNS的基因標(biāo)記，但不能用來(lái)作為致病性與非致病性的葡萄球菌的鑒別依據(jù)。
　　 5、目前區(qū)分致病性與非