基質金屬蛋白酶及其抑制因子在腎小球硬化大鼠腎臟中的表達意義及維甲酸的干預.pdf

1、第一部分 目的：探討基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)及金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)在阿霉素腎小球硬化(GS)大鼠腎臟組織中的表達和意義。 方法：將40只雄性8周齡Wistar大鼠隨機分為假手術組(A組，n=20)和模型組(B組，n=20)。B組大鼠予10％水合氯醛(3ml/kg)腹腔注射麻醉后，在無菌條件下背側切口行左腎切除術，1周后給予尾靜脈注射阿霉素(5mg/Kg)；A

2、組大鼠腹腔注射麻醉后予以假手術(僅探及腎包膜)，1周后尾靜脈注射等容積生理鹽水。造模后第12周末處死大鼠，取右側腎臟組織作病理檢查，計算腎小球硬化指數(GSI)。用免疫組化法檢測腎臟組織Ⅳ型膠原(Col-Ⅳ)、纖維連接蛋白(FN)、MMP-2、MMP-9和TIMP-1的蛋白表達。 結果：與A組比較，B組大鼠腎臟組織MMP-2和MMP-9的蛋白表達顯著減少(P<0.05)，Col-Ⅳ、FN和TIMP-1的蛋白表達顯著增高(P<0.

3、05)，TlMP．1/MMP-2和’TlMP-1/MMP-9 的比值顯著增高(P<0.05)。腎臟組織TlMP-1/MMP-2和TIMP-l/MMP-9 比值與GSI均呈顯著正相關(r=0.994，0.959)；與Col-Ⅳ均呈顯著正相關(r-0.783，0.760)；與FN均呈顯著正相關(r=0.707，0.702)。 結論：TIMP-1/MMP-2、TIMP-1/MMP-9比值的升高，使腎小球細胞外基質(ECM)降解減少，導

4、致ECM過度積聚，參與了GS的發(fā)生發(fā)展。 第二部分 目的：觀察全反式維甲酸(ATRA)對阿霉素GS大鼠腎臟基質金屬蛋白酶及其抑制因子的影響，并探討其可能的作用機制。 方法：將80只雄性8周齡Wistar大鼠隨機分為假手術組(A組，n=20)、模型組(B組，n=20)、苯那普利組(C組，n=20)和．ATRA組(D組，n=20)。模型建立方法同第一部分，造模后C組給予苯那普利(10mg/kg．d)灌胃，D組給予AT

5、RA(20mg/kg．d)灌胃，A、B組給予等容積生理鹽水灌胃。造模后第12周末取血尿標本后處死大鼠，取右腎；檢測大鼠BUN、Scr及24小時尿蛋白含量；腎臟病理切片行HE染色，計算GSI；免疫組化法檢測腎臟組織Col-Ⅳ、FN、MMP-2、MMP-9和TIMP-l的蛋白表達；明膠酶譜法檢測腎臟組織MMP-2、MMP-9的活性；實時熒光定量RT-PCR法檢測腎臟組織MMP-2、MMP-9及TIMP-1的mRNA表達。 結果：與B

6、組比較，C組與D組大鼠BUN、24小時尿蛋白含量及GSI均顯著降低(P<0.05)，D組大鼠Scr含量顯著降低(P<0.05)；C組與D組大鼠腎臟組織Col-Ⅳ和FN的蛋白表達顯著減少(P<0.05)，腎臟組織TIMP-1的蛋白表達及mRNA表達顯著下降(P<0.05)，MMP-2和MMP-9的蛋白表達及mRNA表達顯著增加(P均<0.05)，MMP-2和：MMP-9的酶活性顯著增強(P