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1、目的:Utrophin是dystrophin的同源蛋白,在dystrophin蛋白不足時(shí)有替代dystrophin的潛力。本研究選用EIMD為切入點(diǎn)采用損傷特征明顯的離心運(yùn)動(dòng)方式模擬“高住低訓(xùn)”模式,從utrophin蛋白的角度來研究低氧對(duì)EIMD膜損傷影響及可能的分子機(jī)制。
方法:將70只八周齡健康的SD雄性大鼠(體重196.75±8.14g)隨機(jī)分成:安靜組(C);常氧下運(yùn)動(dòng),常氧組(N);常氧下運(yùn)動(dòng),低氧組(H);后兩組
2、又隨機(jī)分為3個(gè)亞組:24H組、48H組、72H組。共7組,每組10只。低氧環(huán)境的氧濃度為12.7%。每組各取2只腹腔注射熒光染料EBD(Evans blue dye,伊文氏藍(lán))來檢測(cè)肌細(xì)胞膜通透性。運(yùn)動(dòng)方式采用坡度為-16度的大負(fù)荷間歇性下坡跑,運(yùn)動(dòng)速度為26.8米/分,運(yùn)動(dòng)5分鐘×10組,組間歇1分鐘。運(yùn)動(dòng)結(jié)束后,取大鼠小腿腓腸肌用Western blot、RT-PCR和熒光免疫組化方法進(jìn)行dystrophin基因表達(dá)、utrophi
3、n蛋白含量和基因表達(dá)等指標(biāo)的測(cè)定。
結(jié)果:一次性離心運(yùn)動(dòng)后N24h和H24h組均出現(xiàn)EBD陽性纖維,常氧組EBD陽性細(xì)胞數(shù)先增加后減少,低氧組EBD陽性細(xì)胞數(shù)逐漸降低,均顯著高于安靜組(P<0.05)。低氧組和常氧組dystrophin基因表達(dá)量隨時(shí)間推移均逐漸下降,且均明顯低于安靜組(P<0.05)。與安靜組相比,H24h和H48h組utrophin蛋白含量顯著增高(P<0.05),72h組降低明顯,恢復(fù)至接近安靜組水平。隨
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