海水養(yǎng)殖廢水的微生物修復(fù)研究——關(guān)鍵微生物的誘變及固定化.pdf

1、分類號(hào)密級(jí)天津商業(yè)大學(xué)碩士研究生畢業(yè)（學(xué)位）論文碩士研究生畢業(yè)（學(xué)位）論文姓名：宋霖霞名：宋霖霞年級(jí)：級(jí)：2008級(jí)專業(yè)：發(fā)酵工程業(yè)：發(fā)酵工程研究方向：微生物資源開發(fā)與利用研究方向：微生物資源開發(fā)與利用論文題目：海水養(yǎng)殖廢水的微生物修復(fù)研究論文題目：海水養(yǎng)殖廢水的微生物修復(fù)研究—關(guān)鍵微生物的誘變及固定化關(guān)鍵微生物的誘變及固定化導(dǎo)師：王素英師：王素英教授教授完成日期：完成日期：2011年4月天津商業(yè)大學(xué)中文摘要海水養(yǎng)殖是近岸海域和養(yǎng)殖水體

2、本身的重要污染源，主要的污染因子是蛋白氮、氨態(tài)氮等含氮化合物和活性磷酸鹽。本課題選擇來源于海水養(yǎng)殖廢水的蛋白酶產(chǎn)生菌、亞硝化細(xì)菌、反硝化細(xì)菌等能夠促進(jìn)海水氮素化合物循環(huán)的菌株為研究對(duì)象，通過不同方法的誘變選育和固定化處理，以提高它們用于轉(zhuǎn)化海水養(yǎng)殖廢水中含氮化合物的能力。首先采用微波和亞硝基胍復(fù)合誘變的方法，對(duì)蛋白酶產(chǎn)生菌ZS7、亞硝化細(xì)菌ZW38和反硝化細(xì)菌ZL5進(jìn)行誘變處理，通過初篩、復(fù)篩及穩(wěn)定性檢驗(yàn)等試驗(yàn)，分別獲得了相應(yīng)的高效菌株

3、YS5、YW5和YL3。其中YS5菌株在溫度為37℃，pH為7.2的條件下發(fā)酵產(chǎn)酶能力最強(qiáng)，蛋白酶活力為2.471103Uml，是出發(fā)菌株的2.2倍。亞硝化細(xì)菌YW5在溫度為37℃，pH值為6.07.2的條件下亞硝酸鹽的生成速率最快，為3.39mgLd1，是出發(fā)菌株的1.5倍；反硝化細(xì)菌YL3在溫度為37℃，pH值為6.07.2的條件下還原亞硝酸鹽的速率最快，為3.05mgLd1，是出發(fā)菌株的1.7倍。同時(shí)實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)采用先NTG誘變后微

4、波誘變及先微波誘變后NTG誘變，這2種復(fù)合誘變方案對(duì)不同供試菌株的誘變效應(yīng)無顯著差異。其次選用聚氨酯泡沫和海藻酸鈉作為固定化載體，固定蛋白酶產(chǎn)生菌YS5，通過對(duì)所得固定化顆粒機(jī)械強(qiáng)度、傳質(zhì)性能、顆粒所含活菌數(shù)及降解廢水中可溶性蛋白的能力試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)以聚氨酯泡沫作載體所制得的固定化顆粒的各項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于海藻酸鈉作載體。這是因?yàn)榫郯滨ヅ菽紫抖啾砻娣e大傳質(zhì)效果好，有利于蛋白酶產(chǎn)生菌的胞外酶外滲，促進(jìn)了固定化顆粒與廢水之間的物質(zhì)循環(huán)，同時(shí)也為固定

5、化細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，因此選用聚氨酯泡沫作為固定蛋白酶產(chǎn)生菌的載體。同時(shí)選用聚乙烯醇（PVA）為載體分別固定化亞硝化細(xì)菌YW5、反硝化細(xì)菌YL3及YW5和YL3的混合菌，經(jīng)過一系列固定化顆粒指標(biāo)的檢驗(yàn)及降解廢水中氨氮的試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)YW5和YL3混合固定優(yōu)于YW5和YL3分別固定，這是因?yàn)閷喯趸?xì)菌和反硝化細(xì)菌固定在同一載體中，實(shí)現(xiàn)了硝化和反硝化時(shí)間和空間上的統(tǒng)一，進(jìn)一步提高了去除氨氮的能力。將制得的固定化小球和處理過廢水的