茯苓乙酸乙酯提取物抗腫瘤活性成分研究.pdf

1、茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf又稱茯菟、茯靈、松薯等,為多孔菌科(Polyporaceae)真菌茯苓的干燥菌核。我國資源豐富,主產(chǎn)于湖北、湖南、安徽等省,其中以湖北羅田九資河所產(chǎn)茯苓品質(zhì)優(yōu)良.茯苓為歷史悠久的傳統(tǒng)中藥,其性平,味甘、淡,具有利水滲濕、健脾和胃、寧心安神的作用;臨床用于小便不利,水腫,脾胃氣虛,食少便溏,體倦乏力以及心神不寧,驚悸,失眠等癥.其主要化學(xué)成分為多糖、三萜、脂肪酸、甾醇等。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,

2、茯苓具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能、抗炎、抗衰老等藥理作用。
　　 本實驗室前期研究表明,茯苓乙酸乙酯提取物具有抗腫瘤生物活性。本論文通過學(xué)科交叉的研究方法,對茯苓乙酸乙酯提取物抗腫瘤活性成分進(jìn)行了研究。采用色譜法對茯苓乙酸乙酯提取物進(jìn)行了較系統(tǒng)的分離純化,從中分離得到4個單體成分,分別為茯苓酸(Pachymic acid,B1)、去氫茯苓酸(Dehydropachymic acid,B2)、薯蕷皂苷(Dioscin,H1)、三角葉薯

3、蕷皂苷(Deltonin,H2)。其中,化合物薯蕷皂苷(Dioscin,H1)和三角葉薯蕷皂苷(Deltonin,H2)為首次從茯苓中發(fā)現(xiàn)。
　　 采用MTT法檢測上述分離的化合物對肝癌(HepG2)、宮頸癌(Caski)、肺癌(H460)、乳腺癌(MDA-MB-231)細(xì)胞株體外增殖的影響,并篩選出敏感的腫瘤細(xì)胞株.研究結(jié)果表明,化合物H1和H2對肝癌細(xì)胞株HepG2、宮頸癌細(xì)胞株Caski、肺癌細(xì)胞株H460、乳腺癌細(xì)胞株M

4、DA-MB-231均有明顯的抑制增殖作用,并呈劑量依賴性和時間依賴性;其中藥物高濃度對肝癌細(xì)胞株HepG2、肺癌細(xì)胞株H460、乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231處理48h和72h抑制率均高達(dá)90％以上,尤其是對乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231更為明顯.比較半數(shù)抑制濃度可知,經(jīng)化合物H1和H2處理乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-231)24h、48h、72h的IC50分別為6.17μg/ml、1.82μg/ml、1.45μg/ml和1.73μg

5、/ml、0.515μg/ml、0.17μg/ml。
　　 通過Hoechst33258染色觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化,初步探討了化合物H1和H2的抗腫瘤機(jī)制.研究結(jié)果表明,乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-231)經(jīng)化合物H1和H2(2-15μg/ml)處理24h后,Hoechst33258染色呈現(xiàn)明顯的細(xì)胞凋亡形態(tài)特征,表明化合物H1和H2具有誘導(dǎo)MDA-MB-231細(xì)胞凋亡作用。綜合分析本論文的研究結(jié)果,對于詮釋茯苓的抗腫瘤藥效物質(zhì)基礎(chǔ)