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文檔簡介
1、本實驗擬通過觀察醇煎法制成的夏枯草提取物對人T淋巴瘤白血病細(xì)胞株Jurkat、人食管癌細(xì)胞株Eca-109活性的影響,并運用細(xì)胞生物學(xué)的方法對Jurkat細(xì)胞凋亡的特點及可能的機制進行探討。 方法: 1.MTT法測定夏枯草提取物對Jurkat細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞的生長抑制率。實驗分三組:①實驗組:加入不同濃度的夏枯草提取物;②陽性對照組:加入不同濃度的長春新堿;③空白對照組:加入等體積的生理鹽水。每個濃度設(shè)四個平行孔,分別作用于
2、Jurkat細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞48小時后,測定細(xì)胞生長抑制率,計算出IC60值。同時用MTT法繪制兩種濃度的夏枯草提取物(80ug/ml,50ug/ml)作用于Jurkat細(xì)胞、(600ug/ml,300ug/ml)作用于Eca-109細(xì)胞的生長曲線,設(shè)空白對照組(加入等體積的生理鹽水)及陽性對照組(長春新堿分別為50ug/ml,20ug/ml)。以上實驗各重復(fù)5次,求平均值。 2.用倒置顯微鏡法、HE染色法觀察細(xì)胞形態(tài),瓊脂糖
3、凝膠電泳法觀察Jurkat細(xì)胞凋亡,用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測夏枯草提取物對凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax蛋白表達的影響,并用圖文分析系統(tǒng)進行定量分析。 結(jié)論: 1.夏枯草提取物對Jurkat細(xì)胞和Eca-109細(xì)胞有顯著的抗增殖作用,其抗增殖作用呈明顯的劑量依賴關(guān)系。其對Eca-109細(xì)胞的抗增殖作用不如對Jurkat細(xì)胞明顯。 2.夏枯草提取物抗Jurkat細(xì)胞增殖可能是通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而進行。 3.夏枯草提取物誘導(dǎo)Jurkat細(xì)
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