夏枯草黃酮的提取、純化及其生物活性研究.pdf

1、夏枯草為唇形科夏枯草屬植物夏枯草的干燥成熟果穗,因“此草夏至后即枯”得名,具有消腫止痛、清火明目、散結(jié)等功效,是我國傳統(tǒng)的中草藥。夏枯草中的主要活性成分為黃酮類化合物、甾醇類及其苷類化合物、香豆素化合物、三萜及其苷類化合物、揮發(fā)油、苯丙素類化合物、有機(jī)酸等。
　　 到目前為止,對(duì)夏枯草中的黃酮類化合物提取、分離純化以及產(chǎn)品的生物活性未見有系統(tǒng)的報(bào)道,影響了夏枯草活性成分的開發(fā)和利用。
　　 本文對(duì)夏枯草中的黃酮化合物進(jìn)行

2、了較為系統(tǒng)的研究,旨在充分利用這一豐富的藥材資源,為研究開發(fā)我國具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新藥提供科學(xué)的依據(jù)。主要研究?jī)?nèi)容及實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　 1.對(duì)夏枯草的常規(guī)成分進(jìn)行了分析。結(jié)果如下(g／100 g,干重):總灰分含量為12.55,蛋白質(zhì)含量為9.77,總糖含量為10.21,還原糖含量為1.32,脂肪含量為4.91,總多酚含量為2.78。采用火焰原子吸收法測(cè)定了夏枯草中的Mn、Cu、Mg、Fe、Ca、Zn、Cd等元素。結(jié)果表明,夏

3、枯草中含有較為豐富的微量元素。
　　 2.通過3種不同的提取方法(溶劑回流法、超聲輔助提取法、微波輔助提取法)的比較,同時(shí)結(jié)合響應(yīng)曲面的優(yōu)化對(duì)夏枯草中的黃酮化合物進(jìn)行提取。結(jié)果發(fā)現(xiàn),溶劑回流法優(yōu)于其他兩種提取方法,其最佳提取條件為:乙醇體積分?jǐn)?shù)為20％、提取溫度為97.8℃、提取時(shí)間為3.2 h、液固比40:1,在此條件下夏枯草黃酮得率為5.72％。
　　 3.通過靜態(tài)吸附、靜態(tài)解吸及吸附動(dòng)力學(xué)研究,對(duì)D101、AB-8

4、、NKA-9和NKA-Ⅱ4種大孔吸附樹脂進(jìn)行篩選,發(fā)現(xiàn)AB-8樹脂對(duì)夏枯草黃酮有較好的吸附和解析能力,同時(shí)對(duì)AB-8樹脂分離純化夏枯草中總黃酮的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明,弱極性樹脂.AB-8的吸附率為90.29％,解吸率為81.29％,是性能良好的總黃酮吸附劑,其最佳條件為:上樣濃度3.732 mg／mL,pH為5左右,上樣流速2 mL／min,洗脫液乙醇體積分?jǐn)?shù)40％,解吸液體積5BV,解吸流速1.5 mL／min。經(jīng)AB-8大孔

5、樹脂純化后,夏枯草乙醇提取物中總黃酮的純度由46.25％提高到81.58％。
　　 4.通過測(cè)定純化后的夏枯草黃酮對(duì)DPPH和羥基自由基的清除能力、總還原能力、總抗氧化能力、β-胡蘿卜素的漂白實(shí)驗(yàn)來研究其抗氧化能力。結(jié)果表明,純化后的夏枯草黃酮具有良好的抗氧化能力,可作為一種新型的天然抗氧化劑。
　　 5.選取大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、黑曲霉、米曲霉等5種菌種,用純化后的的夏枯草黃酮進(jìn)行體外抑菌實(shí)驗(yàn),對(duì)最低