雞油菌多糖提取、純化及其生物活性的研究.pdf

1、雞油菌(Cantharelles cibarius)別名黃絲菌、杏菌,是一種外生根真菌,是世界著名的野生食用菌,在我國(guó)主要分布在云南、四川、貴州、西藏等省。研究表明,雞油菌富含胡蘿卜素、VA、Vc和鈣、鐵、磷等多種礦物質(zhì)元素,具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及特殊的藥用保健功效。本課題以雞油菌為原料,采用熱水浸提法提取雞油菌多糖,并對(duì)得到的粗多糖進(jìn)行分離純化,進(jìn)一步研究了雞油菌多糖的性質(zhì)及組分、雞油菌多糖的抗氧化活性及其降血糖作用,為拓展雞油菌多糖的

2、應(yīng)用提供理論依據(jù)和基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　　 (1)以雞油菌為原料,分別對(duì)熱水浸提和微波法浸提雞油菌多糖的最佳提取工藝進(jìn)行了研究。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)研究了浸提溫度、浸提時(shí)間、液料比對(duì)雞油菌多糖提取率的影響。結(jié)果顯示,熱水浸提法的最佳工藝為:液料比20:1,浸提時(shí)間2h,浸提溫度85℃,在此條件下多糖的得率可達(dá)8.93％。
　　 通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定的微波提取最佳工藝條件為:微波功率600W,微波時(shí)間35min,微波浸提溫度

3、85℃,液料比55:1,在此條件下,粗多糖得率為10.19％。
　　 對(duì)兩種提取方法進(jìn)行比較,結(jié)果顯示,微波法比熱水浸提取法具有較高的多糖提取得率,微波法能提高粗多糖得率14.1％。
　　 (2)用微波法提取制備的雞油菌粗多糖,經(jīng)Sevage法脫蛋白質(zhì),大孔樹(shù)脂脫色,透析并經(jīng)DEAE-52分離后得到一個(gè)主要組分CCP-2,冷凍干燥后為白色粉末,經(jīng)SephdexG-100凝膠層析分析為雞油菌多糖純品。
　　 (3)

4、通過(guò)對(duì)雞油菌多糖紅外光譜的特征吸收進(jìn)行解析,結(jié)果表明,雞油菌多糖含有羧基,是一種酸性多糖。HPLC結(jié)果表明:雞油菌單糖組成包括甘露糖、葡萄糖、D-半乳糖和L-阿拉伯糖4種單糖,由峰面積歸一化計(jì)算可知,甘露糖、葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖4種單糖的物質(zhì)的量之比為42.79:49.56:1.75:3.78。
　　 (4)通過(guò)測(cè)定雞油菌多糖的還原性及對(duì)羥自由基(·OH)以及1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)的清除能力,研

5、究了雞油菌多糖的抗氧化性。結(jié)果表明,雞油菌多糖具有一定的還原能力；在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi),雞油菌多糖對(duì)·OH以及DPPH·都具有較強(qiáng)的清除作用,清除能力隨多糖濃度的增大而增大。在濃度相同的情況下,雞油菌多糖對(duì)·OH的清除能力比對(duì)照組Vc稍弱,對(duì)DPPH·的清除能力強(qiáng)于Vc。純化后的雞油菌多糖對(duì)·OH和DPPH·的清除能力不如雞油菌多糖粗品,但其清除能力仍具有顯著性。
　　 (5)通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),研究雞油菌多糖的降血糖作用。對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠灌胃

6、3種劑量的雞油菌多糖,灌胃低、中、高劑量組(100mg/kg*d、200mg/kg*d和400mg/kg*d)的小鼠血糖值均顯著性降低(P<0.01),降糖率分別達(dá)到15.9％、23.9％和29.2％,說(shuō)明雞油菌多糖具有一定的降血糖功效。檢測(cè)小鼠肝臟超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性的結(jié)果顯示,灌胃雞油菌多糖4周后,藥物對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)低、中、高劑量組的小鼠肝臟SOD活性和GSH—Px