匙羹藤多糖的分離純化及其生物活性研究.pdf

1、匙羹藤[Gymnema sylvestre(Retz.) Schult.]為蘿摩科匙羹藤屬類植物，其主要活性成分為三萜皂甙類物質(zhì)，又稱匙羹藤酸(Gymnemicacid，簡(jiǎn)稱GA)。研究表明，匙羹藤葉提取物具有降血糖、降血脂、抗齲齒、抑制甜味和抑制肥胖等作用，可用來防治糖尿病和肥胖癥，目前對(duì)匙羹藤的研究主要集中在三萜皂甙類成分及其提取物的藥理活性，對(duì)多糖等成分的研究未見報(bào)道。多糖是一重要的活性成分，已成為天然藥物研究的一個(gè)熱點(diǎn)，許多植物

2、多糖具有抗腫瘤、降血糖、抗氧化和抗病毒等多種藥理活性，具有重要的研究和開發(fā)價(jià)值。本論文以我國(guó)廣西產(chǎn)匙羹藤葉為原料，研究匙羹藤多糖的提取和純化工藝、匙羹藤多糖的免疫活性、抗腫瘤以及抗氧化活性，為匙羹藤多糖保健食品及藥品的開發(fā)提供基礎(chǔ)。
　　主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：
　　1.研究了水提法提取匙羹藤多糖的工藝條件。以匙羹藤多糖的得率為考察指標(biāo)，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用四因素三水平正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選了提取工藝，最佳提取工藝條件為：

3、溫度100℃、固液比1:15、時(shí)間3h和提取次數(shù)2次，在該工藝條件下匙羹藤多糖得率為2.21％，粗多糖中多糖含量為25.57％。影響匙羹藤多糖得率因素的主次順序?yàn)闇囟?、時(shí)間、提取次數(shù)和固液比。
　　2.研究了匙羹藤多糖的免疫活性。結(jié)果表明：匙羹藤粗多糖(GSP-1)在劑量300mg/kg下，能增強(qiáng)免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能(p＜0.05)；在100mg/kg、300mg/kg下，能提高免疫抑制小鼠血清溶血素水平(p＜0.

4、05或p＜0.001)；在劑量300mg/kg下，能增加免疫抑制小鼠胸腺指數(shù)和脾指數(shù)(P＜0.05或p＜0.01)。匙羹藤脫蛋白多糖(GSP-2)在劑量100mg/kg、300mg/kg下，能增強(qiáng)免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能(p＜0.05)；在100mg/kg、300mg/kg下，能提高免疫抑制小鼠血清溶血素水平(p＜0.05或p＜0.001)；在100mg/kg、300mg/kg下，能增加免疫抑制小鼠胸腺指數(shù)和脾指數(shù)(P＜0.0

5、5或p＜0.01)。
　　3.研究了匙羹藤多糖的純化工藝。匙羹藤多糖經(jīng)脫蛋白、脫色、透析及DEAE-52柱層析純化后，得到了五種多糖組分：GSP11、GSP22、GSP33、GSP44和GSP55，純度分別為80.7％、87.3％、84.2％、90.8％和94.9％，HPLC法測(cè)得五種多糖組分的分子量分別為52951、544820、954496、1049851和1896802。采用氣相色譜法測(cè)定了五種多糖組分的單糖組成。結(jié)果表明

6、：GSP11是由木糖和葡萄糖組成，其摩爾比為木糖：葡萄糖=1:2.47;GSP22和GSP33是由鼠李糖，葡萄糖和半乳糖組成，其摩爾比分別為鼠李糖：葡萄糖：半乳糖=1.6:1:1.22，1:1.5:1.1;GSP44是由木糖、葡萄糖和半乳糖組成，其摩爾比為木糖：葡萄糖：半乳糖=1:1.03:1.2;GSP55是由鼠李糖、木塘、葡萄糖和半乳糖組成，其摩爾比為鼠李糖：木糖：葡萄糖：半乳糖=1:1.21:1.81:2.58。
　　4.

7、采用MTT法，研究了匙羹藤多糖的體外抗腫瘤活性。結(jié)果表明：GSP-1、GSP-2、GSP11、GSP22、GSP33、GSP44和GSP55對(duì)人胃癌細(xì)胞(AGS、SGC)、人血癌細(xì)胞(U937)都有不同程度的抑制作用，其中多糖組分GSP11對(duì)U937的抑制作用最好，濃度為160μg/mL時(shí)，抑制率達(dá)69.46％；多糖組分GSP22對(duì)SGC的抑制作用最好，濃度為160μg/mL時(shí)，抑制率達(dá)69％。
　　5.采用水楊酸法，研究了匙羹