血桐葉三種活性測試及結(jié)構(gòu)鑒定研究.pdf

1、大戟科血桐屬植物，是重要的藥材樹種，在我國多個地區(qū)均有分布。據(jù)文獻(xiàn)報道，該植物可用于治療惡性腫瘤、潰瘍腫痛、糖尿病、止咳、刀傷擦傷、神經(jīng)系統(tǒng)及心血管疾病等。本論文研究了血桐葉提取物的抗氧化、抑菌和抗腫瘤作用，以期為開發(fā)血桐的藥用價值提供科學(xué)依據(jù)。
　　 本論文以血桐葉為原材料，用不同極性溶劑萃取，制備得到醇提物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物與水層部分。采用體外實驗方法對血桐各提取物進(jìn)行抗氧化活性研究，包括多酚含量測

2、定、DPPH清除能力、超氧陰離子清除能力、還原能力測定及黃酮含量測定;用抑菌圈實驗及最低抑制濃度(MIC)實驗進(jìn)行體外抑菌活性的研究;用MTT法檢測血桐各提取物對人結(jié)腸細(xì)胞LOVO、人胃癌細(xì)胞MKN45、AGS、人肝癌細(xì)胞SK-HEP1、HEPG-2五種腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用，篩選出有效的萃取部位;運用多種色譜技術(shù)對乙酸乙酯萃取物進(jìn)行單體化合物的分離。
　　 抗氧化實驗結(jié)果顯示:血桐正丁醇萃取物的還原能力最強，石油醚萃取物及水層

3、部位的還原能力最不明顯;各提取物對DPPH、超氧陰離子均具備一定的清除能力，且隨著樣品液的濃度增加，其清除效果增加，其中，血桐葉的正丁醇萃取部位的清除能力最佳，血桐的正丁醇萃取物中多酚與黃酮含量均最高。這一發(fā)現(xiàn)為尋找到高效新型的防腐劑和抗氧化劑提供了科學(xué)依據(jù)。
　　 血桐各提取物均具有抑制金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、藤黃微球菌、大腸桿菌及枯草芽胞桿菌的作用，其中血桐乙酸乙酯萃取物的抑制效果最好，MIC分別為0.2 mg/mL、

4、0.2 mg/mL、0.3 mg/mL、3.0 mg/mL、1.5 mg/mL。
　　 血桐各提取物經(jīng)MTT法檢測證明，血桐醇提物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物對五種腫瘤細(xì)胞的活力抑制作用較為明顯，其中，醇提物對LOVO、MKN45、AGS、SK-HEP1、HEPG-2的IC50分別為0.460、0.082、0.210、0.201、0.371 mg/mL;石油醚萃取物IC50分別為0.189、0.138、0.295、0.143、

5、0.193 mg/mL;乙酸乙酯萃取物的IC50依次為0.226、0.093、0.155、0.07、0.118 mg/mL，正丁醇萃取物對肝癌細(xì)胞HEPG-2有較好生長抑制作用，IC50為0.245，對結(jié)腸癌細(xì)胞(LOVO)、胃癌細(xì)胞MKN45抑制作用差，水層部位對MKN45細(xì)胞的活力具有較好抑制作用，其IC50為0.264 mg/mL，對其他四種腫瘤細(xì)胞的增殖具有較差的抑制作用。
　　 實驗證明了血桐乙酸乙酯的抑菌與抗腫瘤效果

6、均最佳，因此在此基礎(chǔ)上采用MTT法對血桐乙酸乙酯萃取物進(jìn)行追蹤分離，尋找血桐抗腫瘤活性單體化合物，并觀察其抗腫瘤作用。本論文采用硅膠柱色譜、ODS反相色譜、Sephadex LH-20色譜、pre-HPLC等多種色譜技術(shù)對血桐提取物的乙酸乙酯萃取部分進(jìn)行分離純化，利用波譜法（1H-NMR、13C-NMR和IR），并結(jié)合理化常數(shù)分析對這些單體化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，先后分離鑒定了2個化合物，分別為沒食子酸、6-羥基-8甲氧基香豆素，其中