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文檔簡介
1、油橄欖(Olea europaea L.)為木犀科(Oleaceae)木犀欖屬(Olea)常綠喬木,是世界上著名的亞熱帶木本油料樹種。不僅其果富含高不飽和脂肪酸的油脂和豐富的酚類物質(zhì),且葉中含有與果實(shí)類似甚至含量更高的活性酚類物質(zhì),具有重要的研究前景和應(yīng)用價(jià)值。由于我國油橄欖種植起步較晚,目前對(duì)其研究主要集中在種質(zhì)資源和果實(shí)方面,而對(duì)其葉的研究和利用相對(duì)更加滯后。在油橄欖種植地,每年修剪和采摘果實(shí)季節(jié)產(chǎn)生的大量枝葉絕大多數(shù)被廢棄,造成資
2、源浪費(fèi)。為此,本文對(duì)西昌油橄欖葉中總酚、總黃酮和橄欖苦苷的含量動(dòng)態(tài)變化以及橄欖苦苷的分離、鑒定和體外活性進(jìn)行了研究,為油橄欖品種的選育及油橄欖葉的綜合開發(fā)利用提供參考,這對(duì)提高果農(nóng)的生產(chǎn)收益,促進(jìn)我國油橄欖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。其主要研究結(jié)果如下:
1.采用福林酚法、三氯化鋁法和紫外-可見光譜差減法分別測定了西昌29個(gè)油橄欖品種葉中總酚、總黃酮和橄欖苦苷一年內(nèi)不同時(shí)期的含量。結(jié)果表明,不同品種不同月份間油橄欖葉中總酚、總
3、黃酮和橄欖苦苷含量差異較大:全年內(nèi),坦彩的總酚含量最高(37.20%),同時(shí)也出現(xiàn)含量最低(14.20%)的品種,但巴利亞的年平均含量最高(30.06%);切姆阿爾的總黃酮含量最高(1.39%),云臺(tái)最低(0.30%),但奧托卡的年平均含量最高(0.82%);小蘋果的橄欖苦苷含量最高(19.57%),美蘭開最低(1.56%),但巴利亞的年平均含量最高(13.64%)。全年內(nèi),29個(gè)油橄欖品種葉中總酚于1月份含量最高,9月份含量最低;橄欖
4、苦苷在1月份含量最高,7月份含量最低;總黃酮在4月份含量最高,7月份含量最低??傮w變化趨勢為冬春季含量偏高,夏秋季含量偏低。
2.分別以80%甲醇、80%乙醇、丙酮、乙酸乙酯、水作為提取溶劑,采用超聲波輔助法對(duì)油橄欖葉中活性成分進(jìn)行提取,并對(duì)各溶劑提取物的體外活性和化學(xué)成分進(jìn)行了分析。結(jié)果表明:各溶劑提取物均具有較強(qiáng)的抑菌和抗氧化活性,其中80%甲醇提取物的抑菌和抗氧化活性均最強(qiáng),乙酸乙酯提取物的抗氧化活性最弱,而水提取物的抑
5、菌活性最弱。經(jīng)液相色譜-質(zhì)譜法(LC-MS)分析顯示:水提取物和醇提取物中化合物種類較多,而丙酮提取物和乙酸乙酯提取物中化合物較少。在各溶劑提取物中均含橄欖苦苷和Ligstroside2種成分,除水提取物外其他溶劑提取的橄欖苦苷含量較高,而水提取物中特有脫乙酰-10-羥基橄欖苦苷甘元和10-羥基橄欖苦苷2種物質(zhì)。
3.以80%甲醇為提取溶劑,采用超聲波輔助法對(duì)油橄欖葉進(jìn)行提取,提取液依次經(jīng)過石油醚和乙酸乙酯多次萃取、濃縮、硅膠
6、柱層析、再濃縮、真空干燥,獲得橄欖苦苷純樣;經(jīng)紫外可見光譜(UV)、紅外光譜(IR)、核磁共振(NMR)和質(zhì)譜(MS)分析,以橄欖苦苷標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照,確定提純樣品為橄欖苦苷。HPLC分析顯示,純樣品得率為13.52%,樣品純度達(dá)96.54%,純化率為78.49%。
4.以Vc和BHT作為陽性對(duì)照,采用5種方法綜合評(píng)價(jià)橄欖苦苷的體外抗氧化活性。結(jié)果顯示:橄欖苦苷具有較強(qiáng)的抗氧化活性,其活性緊次于Vc,且總抗氧化能力、總還原能力和亞
7、硝酸鹽清除能力均強(qiáng)于BHT,而自由基清除能力與BHT相當(dāng)。因此,橄欖苦苷可以作為更好的、安全的、天然的抗氧化劑、食品添加劑或者防腐劑等廣泛被開發(fā)和應(yīng)用。
5.采用濾紙片法考察了橄欖苦苷對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的抑制作用,用稀釋法分析了橄欖苦苷對(duì)這3種細(xì)菌生長曲線的影響及其最低抑菌濃度(MIC)。結(jié)果表明:橄欖苦苷具有較強(qiáng)的抑菌活性,對(duì)大腸桿菌抑制作用最強(qiáng),MIC為0.025 mg/mL;其次為金黃色葡萄球菌,M
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