RFRP-3在湖羊雄性生殖器官中的表達(dá)及其受營養(yǎng)水平的影響.pdf

1、湖羊作為一個(gè)高繁殖力綿羊品種，目前的研究主要集中在雌性湖羊的繁殖生理，而對雄性湖羊的繁殖生理關(guān)注較少。2000年，日本科學(xué)家Tsutsui等從日本鵪鶉腦內(nèi)成功分離提純一種RF酰胺肽，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，其為C末端具有RF酰胺的十二肽，而且對鳥類垂體前葉GnRH的分泌有抑制作用，故命名為促性腺激素抑制激素（Gonadotropin-inhibitory hormone，GnIH）。RF酰胺相關(guān)肽-3(RFamide-relatedpeptid

2、e-3，RFRP-3)是GnIH在哺乳動(dòng)物體內(nèi)的同系物，它可以調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物的繁殖、攝食、焦慮、應(yīng)激和能量平衡等行為，是目前生殖生物學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一，已在多種動(dòng)物的不同組織均有表達(dá)，但其在雄性湖羊生殖系統(tǒng)中的表達(dá)情況還不清楚。本試驗(yàn)主要利用熒光定量PCR、免疫組化等技術(shù)，以10日齡、4月齡和8月齡的雄性湖羊的睪丸、附睪頭、附睪體、附睪尾和輸精管為研究對象，檢測RFRP-3在其發(fā)育過程中各組織的定位及表達(dá)情況;再以6月齡湖羊雄性生殖器官

3、為研究對象，分析不同營養(yǎng)水平飼喂下，RFRP-3、GnRHR、FSHR和LHR基因在雄性湖羊生殖器官的表達(dá)變化，旨在研究分析RFRP-3在雄性湖羊生殖器官生長發(fā)育過程中的作用，以及其參與繁殖營養(yǎng)調(diào)控的作用。主要的研究結(jié)果如下:
　　1.RFRP-3蛋白在湖羊雄性生殖器官發(fā)育過程中的定位研究。RFRP-3蛋白主要分布于8月齡湖羊睪丸的生精小管內(nèi)部、輸精管及附睪;RFRP-3蛋白在8月齡湖羊附睪的假復(fù)層柱狀上皮和輸精管的粘膜層中強(qiáng)烈表

4、達(dá)，而在4月齡和10日齡湖羊生殖器官中微弱表達(dá)。
　　2.RFRP-3基因在湖羊雄性生殖器官發(fā)育過程中的定量研究。在10日齡湖羊組中，RFRP-3基因在附睪頭、附睪體、附睪尾、睪丸和輸精管組織中表達(dá)量差異不顯著。在4月齡和8月齡湖羊組中，RFRP-3基因在附睪頭、附睪體、附睪尾和睪丸的表達(dá)量差異不顯著，而在輸精管中的表達(dá)量顯著高于其他組織(P＜0.05)。此外，在同一月齡不同組織中RFRP-3基因mRNA表達(dá)水平也存在一定的差異。

5、
　　3.不同營養(yǎng)水平下對湖羊雄性生殖器官中RFRP-3、GnRHR、FSHR和LHR基因mRNA表達(dá)的影響。在高能高蛋白水平飼喂下，RFRP-3基因在雄性湖羊生殖器官中表達(dá)量顯著低于正常飼喂水平，而GnRHR、FSHR和LHR基因mRNA表達(dá)量顯著高于正常飼喂水平。
　　以上試驗(yàn)結(jié)果證明，RFRP-3在湖羊雄性生殖器官中廣泛分布，其表達(dá)量在湖羊不同生殖器官、不同月齡和不同飼喂水平條件下差異顯著。本研究為進(jìn)一步探討RFRP-