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文檔簡介
1、本論文以色氨酸為試驗材料,以白水貂為研究對象,采用飼養(yǎng)試驗、消化代謝試驗、屠宰試驗、分子生物學試驗等研究方法,探索飼糧色氨酸水平對生長期白水貂生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝規(guī)律、血清生化指標、免疫因子水平、血清中氨基酸的含量、毛皮品質(zhì)等的影響,確定白水貂飼料中色氨酸的適宜添加量,結(jié)合白水貂空腸轉(zhuǎn)錄組試驗,初步研究色氨酸的調(diào)控機制,為完善白水貂理想氨基酸模型奠定基礎。
試驗一:飼糧色氨酸水平對育成期白水貂生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率和血
2、清指標的影響
本試驗采用單因素隨機試驗設計,選取120只健康、日齡相近(60d±5d)、體重相近的白水貂,隨機分成6個組,每組20只,公母各半,單籠飼養(yǎng)。在基礎飼糧蛋白質(zhì)水平為34%的基礎上,負對照組不添加色氨酸(Ⅰ組),試驗組添加色氨酸量分別為0.1%(Ⅱ組)、0.3%(Ⅲ組)、0.5%(Ⅳ組)、0.7%(Ⅴ組),正對照組的基礎蛋白質(zhì)水平為36%和不添加色氨酸(Ⅵ組)。本試驗預試期7天,試驗期60天。其試驗結(jié)果如下:
3、 飼糧色氨酸水平對育成期白水貂采食量、日增重均無顯著差異(P>0.05),公貂Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅵ組平均日增重略高于其他各組,母貂Ⅱ組平均日增重略高于其他組。公貂Ⅲ組氮沉積最高,顯著高于Ⅳ組(P<0.05),母貂Ⅱ組氮沉積最高。Ⅱ組、Ⅲ組母貂血清生化指標膽固醇、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶顯著或極顯著低于Ⅳ組(P<0.01或P<0.05)。Ⅲ組公貂IgM水平極顯著高于其他各組(P<0.01),Ⅰ組、Ⅱ組IgA、IgG水平極顯著高于Ⅴ組、Ⅵ組(P<
4、0.01)。Ⅱ組母貂IgG極顯著高于Ⅲ組(P<0.01),Ⅱ組、Ⅲ組IgM水平極顯著高于Ⅳ組、Ⅵ組(P<0.01)。
小結(jié):(1)對于生長性能和蛋白質(zhì)、脂肪、干物質(zhì)消化率等的影響結(jié)果表明,育成期公貂飼糧色氨酸添加水平為0.3%(飼糧色氨酸水平0.52%)時比較理想,母貂飼糧色氨酸添加水平為0.1%(飼糧色氨酸水平0.32%)可以獲得最好的生長性能。(2)對于氨基酸消化率的影響結(jié)果表明,育成期公母貂飼糧色氨酸添加水平為0.1%(
5、飼糧色氨酸水平0.32%)可以獲得最好的氨基酸沉積。(3)對于血清生化指標的影響結(jié)果表明,育成期公母飼糧色氨酸添加水平達到0.5%(飼糧色氨酸水平0.72%)時,對其肝臟功能造成損傷,導致膽固醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶水平顯著升高,并且影響水貂免疫功能。育成期水貂飼糧中色氨酸適宜水平為0.32%~0.52%。
試驗二:飼糧色氨酸水平對冬毛期白水貂生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率、血清指標和毛皮品質(zhì)的影響
選取體重相近、日齡相
6、近(120d±5d)的試驗白水貂120只,試驗設計同試驗一,預試期5d,正試期70d。試驗結(jié)果表明:
Ⅰ組公貂血清IGF-1含量最高,Ⅰ組母貂血清IGF-1含量極顯著高于其他組(P<0.01),各組平均日增重和平均日采食量差異不顯著(P>0.05),公貂隨著飼糧色氨酸添加量的增多,平均日采食量有下降的趨勢;母貂Ⅱ組氮沉積最高。公貂高蛋白組各氨基酸消化率最高,除半胱氨酸、色氨酸外,Ⅵ組氨基酸消化率極顯著高于其他各組(P<0.01
7、),Ⅰ組半胱氨酸和色氨酸消化率與Ⅵ組無顯著差異(P>0.05),母貂高蛋白組各氨基酸消化率也是最高。Ⅱ組公貂谷丙轉(zhuǎn)氨酶最低,膽固醇水平Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組極顯著低于Ⅵ組(P<0.01),母貂Ⅰ組、Ⅵ組甘油三酯水平顯著低于Ⅱ組(P<0.05),血清谷草轉(zhuǎn)氨酶含量Ⅳ組顯著高于Ⅵ組(P<0.05)。公貂Ⅳ組免疫指標和免疫器官指數(shù)均達到最高,母貂IgA水平Ⅰ組顯著高于Ⅱ組、Ⅳ組、Ⅴ組(P<0.05),IgG、IgM及免疫器官指數(shù)Ⅲ組、Ⅳ組最高。比較
8、各組冬毛期毛皮品質(zhì),Ⅱ組綜合品質(zhì)最好。
小結(jié):飼糧色氨酸水平達到0.26%時,可以滿足冬毛期白水貂色氨酸營養(yǎng)的基本需要,獲得較理想的生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率,冬毛期飼糧色氨酸水平在0.26%~0.36%比較適宜。飼糧色氨酸水平達到0.76%時,氨基酸代謝失去平衡,肝臟受到損傷。
試驗三:飼喂不同色氨酸水平飼糧冬毛期公貂空腸組織的轉(zhuǎn)錄組學研究
給白水貂飼喂不同水平色氨酸飼糧,在冬毛期結(jié)束后,Ⅰ組~Ⅴ組每組選取
9、5只公貂進行屠宰試驗獲得空腸組織,對空腸組織進行RNA提取、測序及序列組裝,獲得Unigene組裝總數(shù)97332條,總長度124017345nt,首次建立白水貂空腸組織轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫。
通過與NR、Swiss-Prot、GO、COG、KOG、eggNOG4.5、KEGG數(shù)據(jù)庫比對獲得Unigene注釋,飼糧添加色氨酸試驗組(Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組)注釋的Unigene分別與無添加色氨酸組(Ⅰ組)進行比較。Ⅰ組與Ⅱ組比較,共獲得6
10、5個差異基因,Ⅰ組與Ⅲ組比較,共獲得122個差異基因,Ⅰ組與Ⅳ組比較,共獲得132個差異基因,Ⅰ組與Ⅴ組比較,共獲得55個差異基因。由此發(fā)現(xiàn),Ⅳ組與對照組比較差異基因最多,與試驗二相結(jié)合,Ⅳ組色氨酸含量過高對空腸組織基因組產(chǎn)生影響。
在GO分類下差異基因比對,三大功能分類中免疫系統(tǒng)過程、繁殖過程、生長功能、信號功能、生物附著、胞外區(qū)域及受體活動功能等存在較大差異,從以上功能分類中篩選,總共找到9條相關基因,分別為HSPA8(H
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