肝臟泡型包蟲病患者外周血中調(diào)節(jié)性T細胞及IL--35表達水平的研究.pdf

1、目的：肝臟泡型包蟲病(Hepatic alveolar echinococcosis，HAE)是一種由泡狀棘球蚴(Echinococcus alveolaris，Ea)感染導(dǎo)致的人獸共患的寄生蟲病，主要流行于我國西部牧區(qū)。泡狀棘球蚴感染人體后能夠誘導(dǎo)機體免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)，促進人體對其產(chǎn)生免疫耐受以利于蟲體在人體內(nèi)長期寄生。機體被誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫耐受的機制是由輔助性T細胞(helper T cells，Th)和調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory

2、T cells，Treg)等多種效應(yīng)細胞共同參與的復(fù)雜免疫調(diào)控系統(tǒng)，在宿主體內(nèi)分別形成促進寄生蟲死亡的炎癥反應(yīng)和促進宿主對寄生蟲形成免疫耐受的免疫抑制的作用，兩股力量互相牽制權(quán)衡，最終導(dǎo)致了肝臟泡型包蟲病的慢性感染病程。這一機制中，Th17/Treg平衡在免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)中具有重要的作用，Th17細胞主要以促進棘球蚴死亡的炎性反應(yīng)為主，而Treg細胞能通過分泌相關(guān)具有抑制作用的細胞因子使機體免疫處于抑制狀態(tài)。尤其白介素-35(Interl

3、eukin35，IL-35)是由Treg細胞分泌的一種新型細胞因子，它對Treg細胞的功能具有重要的調(diào)節(jié)作用，目前在關(guān)于泡型包蟲病的研究領(lǐng)域還未見報道。
　　本次研究通過對臨床肝臟泡型包蟲病患者和健康志愿者的外周血中的CD4+CD25+CD127low Treg細胞和IL-35的表達水平進行檢測，初步探討CD4+CD25+CD127low Treg細胞和相關(guān)細胞因子IL-35對于泡型包蟲病發(fā)生發(fā)展過程的表達水平和意義。
　　

4、方法：在2017年01月-2017年09月期間于四川省人民醫(yī)院收治的17例肝臟泡型包蟲病患者和17例健康志愿者被納入到本研究中。將其分為肝臟泡型包蟲病患者組和健康志愿者對照組兩組。采集受試者外周血檢測CD4+CD25+CD127low Treg細胞和IL-35的水平，得到實驗數(shù)據(jù)后用統(tǒng)計學(xué)方法對兩組數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計描述和分析，并以此來比較分析肝臟泡型包蟲病患者和健康志愿者的外周血中CD4+CD25+CD127low Treg細胞和相關(guān)細胞因

5、子IL-35的表達水平的差異。肝臟泡型包蟲病患者接受手術(shù)后第7天再次采集外周血檢測CD4+CD25+CD127low Treg細胞和IL-35的水平，比較與術(shù)前的變化。
　　結(jié)果：在本次研究中發(fā)現(xiàn)肝臟泡型包蟲病患者組的外周血中的CD4+CD25+CD127low Treg細胞占CD4+T細胞的比例為4.68／～10.30(7.97±1.47)％高于健康志愿者對照組外周血中CD4+CD25+CD127low Treg細胞占CD4+T

6、細胞的比例5.09～9.25(6.65±0.99)％，且兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。在肝臟泡型包蟲病患者組的外周血中測得IL-35的表達水平為66.24／～101.23(81.26±10.42)pg/ml高于健康志愿者對照組的外周血中IL-35的表達水平19.59～79.64(42.61±17.80)pg/ml，且兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。肝臟泡型包蟲病患者外周血中的IL-35與CD4+CD25+CD127l

7、ow Treg細胞的水平同步升高，并且使用線性相關(guān)分析的統(tǒng)計學(xué)方法進行分析后得出兩者之間呈正相關(guān)關(guān)系（R=0.5667，P=0.0101)。肝臟泡型包蟲病患者組在接受手術(shù)后第7天再次檢測外周血中的CD4+CD25+CD127low Treg細胞占CD4+T細胞的比例為4.29～8.29(6.23±1.10)％，與術(shù)前和健康對照組相比，三者間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=9.65，P＜0.001)，術(shù)后與術(shù)前相比降低，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=3

8、.05，P＜0.001）;術(shù)后與健康對照組間無統(tǒng)計學(xué)差異(t=1.19，P＞0.05)。肝臟泡型包蟲病患者組在接受手術(shù)后第7天再次檢測外周血中的IL-35為29.24～71.24(51.90±11.78)pg/ml，與術(shù)前和健康對照組相比，三者間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=36.79，P＜0.001)，術(shù)后較術(shù)前有所降低，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=7.70，P＜0.001);術(shù)后與健康對照組間無統(tǒng)計學(xué)差異(t=1.79，P＞0.05)。

9、>　　結(jié)論：本研究首次發(fā)現(xiàn)肝臟泡型包蟲病患者外周血中IL-35的表達水平較健康志愿者顯著升高，且與CD4+CD25+CD127low Treg細胞的增加呈正性相關(guān)關(guān)系。手術(shù)切除包蟲病灶后，患者外周血中CD4+CD25+CD127low Treg細胞和IL-35較術(shù)前均降低。這一現(xiàn)象提示CD4+CD25+CD127low Treg細胞和IL-35可能共同參與了肝臟泡型包蟲病感染泡狀棘球蚴后的免疫應(yīng)答過程，并且CD4+CD25+CD127l