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文檔簡介
1、目的:乙型肝炎病毒感染可引起急性、慢性肝炎、肝硬化和肝細胞癌,是重大的公共衛(wèi)生問題。臨床上,通過檢測HBV血清標志物來輔助判斷HBV感染與否、評價預(yù)后、治療方案和藥物反應(yīng)等。HBsAg是感染乙型肝炎病毒后最早出現(xiàn)在血液中的標志物,具有較強的免疫原性,是檢測乙型肝炎病毒感染情況的最重要的指標之一。本課題目的為應(yīng)用分子生物學(xué)方法構(gòu)建抗HBsAg抗體并研究其生物學(xué)功能。
方法:實驗室前期工作篩得一株抗HBsAg單鏈抗體,我們構(gòu)建
2、了全抗體L/PcDNA3.1(+)H/PcDNA3.1(+)真核表達載體,然后將其轉(zhuǎn)染至293F細胞株,成功表達純化了抗HBsAg抗體HB-19-2,應(yīng)用ELISA方法測定抗體的結(jié)合活性,通過測定HepG2.2.15細胞培養(yǎng)上清HBsAg的含量和HBV DNA拷貝數(shù)評估抗HBsAg抗體HB-19-2的中和乙肝病毒的能力。
結(jié)果:我們成功構(gòu)建表達了具有較強的HBsAg結(jié)合活性和特異性的抗HBsAg單克隆抗體HB-19-2,且
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