富馬酸亞鐵葉酸膠囊的臨床前研究.pdf

1、據世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計:全球大約有30億人都患有不同程度的貧血，每年因為患貧血而導致各類疾病而死亡的人數已經達到上千萬。中國忠貧血的人口概率高于西方國家，在患貧血的人群當中，女性又明顯高于男性，老人和兒童亦高于中青年。本文研究的富馬酸亞鐵與葉酸組合的膠囊劑是一種抗貧血類的新型制劑，其中亞鐵與葉酸的質量比為150∶1，是由世界衛(wèi)生組織最新推薦的用以補充亞鐵與葉酸的最佳配比。目前，國內外未見亞鐵、葉酸按該比例組合的膠囊的研究報道和相關產品的上市

2、，僅見本課題組研究的富馬酸亞鐵與葉酸組合制劑的發(fā)明專利授權(ZL200910191130.7)。根據藥品注冊管理方法中對化學藥品注冊分類及申報要求的文件，本文對富馬酸亞鐵葉酸膠囊的處方工藝進行了篩選，建立了本品的質量標準，又考察了其穩(wěn)定性、急性毒性和一般藥理學，同時還對藥代動力學與生物利用度進行了初步研究，旨在為本膠囊劑的臨床試驗積累資料，并為新藥注冊做準備。
　　 第一部分，本部分對富馬酸亞鐵葉酸膠囊的處方工藝進行了篩選。首先

3、通過等量遞加法將葉酸與富馬酸亞鐵粉末混合，然后裝入膠囊內。該方法具有制備工藝相對簡單、成本低廉等優(yōu)點，適合工業(yè)化生產。
　　 第二部分，本部分初步擬定了富馬酸亞鐵葉酸膠囊的質量標準，建立了HPLC法用以測定該膠囊中葉酸的含量和有關物質，又考察了其溶出度，該法簡單靈敏、專屬性強、重現性良好，葉酸與各雜質能較好地實現分離;另建立了紫外分光光度法用于考察富馬酸亞鐵的含量和溶出度。該膠囊的內容物為紅棕色粉末;葉酸的含量為標示量的99.2

4、7％，有關物質含量低于1％，富馬酸亞鐵的含量為標示量的99.30％，高鐵鹽的含量小于5％;富馬酸亞鐵與葉酸在15min的累積溶出率均達到80％以上，并且溶出均勻。參照2010版《中國藥典》二部附錄的要求和新藥的指導原則，本文最終擬定了富馬酸亞鐵葉酸膠囊的質量標準草案。
　　 第三部分，本部分考察了富馬酸亞鐵葉酸膠囊的穩(wěn)定性，對富馬酸亞鐵葉酸膠囊進行了強光照試驗、加速試驗和長期試驗研究。結果，該膠囊在高濕條件下易吸潮，表明本品應密

5、封在于燥處保存。富馬酸亞鐵葉酸膠囊在加速試驗條件和長期試驗條件下均較穩(wěn)定。
　　 第四部分，富馬酸亞鐵葉酸膠囊急性毒性試驗。本部分首先通過預實驗，得出本品0％與100％小鼠死亡的劑量范圍，分別為872mg/kg、3672mg/kg;再以r=1.25為各劑量組之間的公比，進行正式試驗，觀察小鼠給藥后的死亡情況。連續(xù)觀察7天，記錄所有小鼠的死亡情況、出現的癥狀，以及癥狀的起始時間與嚴重程度。使用改良寇氏法公式，計算得出LD50和95

6、％可信限。結果，本品的LD50值為2199mg/kg，相當于承認口服該藥的計量的733倍，表明本膠囊的毒性極小，95％可信限為1948～2484mg/kg。
　　 第五部分，本部分對富馬酸亞鐵葉酸膠囊進行了一般藥理學的研究。以LD50值的1/20、1/10、1/5分別作為低、中、高三種給藥劑量，考察該藥對中樞神經系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響。結果，試驗組與對照組對小鼠自主活動和協(xié)調功能的影響相比無顯著性差異(P＞0.05)，

7、對戊巴比妥鈉閾下劑量的催眠作用亦未見協(xié)同作用(P＞0.05)，對大鼠的血壓、心率和呼吸頻率亦均未見明顯作用(P＞0.05)。
　　 第六部分，富馬酸亞鐵葉酸膠囊的藥代動力學與生物利用度的研究。建立原子吸收分光光度法測定各時間點的血漿鐵的濃度，并采用DAS2.0藥代動力學軟件進行分析，富馬酸亞鐵葉酸膠囊和普通片的Cmax分別為（10.063±0.507）μg/ml、（8.845±0.486）μg/ml;Tmax分別為1.5h、（1