對羥基苯甲酸酯雄激素受體干擾效應(yīng)及鄰苯二甲酸酯對青?；【锒拘?pdf

1、對羥基苯甲酸酯類(Parabens)和鄰苯二甲酸酯類(Phthalate esters，PAEs)物質(zhì)作為抗菌防腐劑和塑化劑被廣泛的添加到個人護(hù)理品、消費(fèi)品中，其殘留在多種環(huán)境介質(zhì)和生物體內(nèi)被頻繁檢出，目前關(guān)于其人體健康和生態(tài)環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)研究相對匱乏。
　　本文選取不同側(cè)鏈結(jié)構(gòu)和類型Parabens和PAEs物質(zhì)為研究對象，分析了parabens對雄激素受體(Androgen receptor, AR)干擾效應(yīng)，考察了污染物水解后

2、干擾效應(yīng)的變化，探討了其雄激素受體干擾效應(yīng)的分子機(jī)制。以青?；【╒ibrio qinghaiensis sp.-Q67）為模式生物，研究了PAEs與鎘(Cadimum，Cd)的單一和二元聯(lián)合毒性，分析了重金屬Cd脅迫對PAEs急性毒性的影響，并利用經(jīng)典模型預(yù)測了PAEs與Cd的聯(lián)合毒性效應(yīng)。從構(gòu)效關(guān)系角度分析了parabens及PAEs的側(cè)鏈長度和基團(tuán)類型對其毒性的影響。主要獲得如下研究結(jié)果:
　　(1)采用酵母雙雜交方法研究了

3、10種芳氧基和烷氧基側(cè)鏈parabens對AR的干擾效應(yīng)。發(fā)現(xiàn)parabens的烷氧基側(cè)鏈C原子數(shù)為1-4時，AR拮抗效應(yīng)隨側(cè)鏈增長而顯著降低;當(dāng)側(cè)鏈C原子數(shù)為7，8和12時，parabens無顯著AR拮抗效應(yīng)。相比烷氧基側(cè)鏈，具有芳氧基側(cè)鏈的parabens如對羥基苯甲酸芐酯(Benzylparaben，BzP)和對羥基苯甲酸苯酯(Phenyl paraben，PnP)具有相對較高的AR拮抗效應(yīng)。分子對接(Molecular dock

4、ing)揭示與天然雄激素二氫睪酮(Dihydrotestosterone，DHT)具有相似的結(jié)合模式，parabens與AR受體配體結(jié)合域(Ligand binding domain，LBD)877號蘇氨酸和705號天冬酰胺形成氫鍵。Parabens與AR LBD的結(jié)合能量與其AR拮抗效應(yīng)顯著相關(guān)（R2=0.84，P＜0.05）。
　　為進(jìn)一步分析parabens側(cè)鏈對AR拮抗活性的影響，采用豬肝酯酶將parabens水解，發(fā)現(xiàn)水

5、解后parabens的AR拮抗活性完全消除。高效液相色譜串聯(lián)紫外檢測器(HPLC-UV)及超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測器(UPLC-MS/MS)分析發(fā)現(xiàn)parabens水解后酯鍵斷裂，生成對羥基苯甲酸。相較于芳氧基側(cè)鏈parabens，烷氧基側(cè)鏈parabens是豬肝酯酶的最優(yōu)底物，更易于被水解。
　　(2)以Vibrio qinghaiensis sp.-Q67為模式生物，研究了PAEs與Cd的單一和二元聯(lián)合毒性。發(fā)現(xiàn)六種PAEs

6、包括鄰苯二甲酸二甲酯(Dimethyl phthalate，DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(Diethyl phthalate，DEP)、鄰苯二甲酸丁芐酯(Benzylbutyl phthalate，BBP)、鄰苯二甲酸二正丁酯(Dibutyl phthalate，DBP)、鄰苯二甲酸二異辛酯(Diisooctyl phthalate，DIOP)和鄰苯二甲酸二正辛酯(Di-n-octylphthalate，DOP)對青?；【毙远拘缘腅C5

7、0值大于100 mg/L(DMP:134.4 mg/L;DEP:283.1 mg/L; DBP:895.1 mg/L)，說明對青?；【毙远拘暂^弱;隨PAEs側(cè)鏈長度增加，其急性毒性顯著減小(R2=0.8961,P＜0.05)。
　　進(jìn)一步測定了PAEs與Cd的二元聯(lián)合毒性，并結(jié)合獨(dú)立作用(Independentaction，IA)和濃度加和（Concentration addition，CA）模型進(jìn)行了預(yù)測探討。發(fā)現(xiàn)二元混合物D