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1、目的:觀察人體軟骨終板超微結(jié)構(gòu)及頸椎間盤退變的關(guān)系。
方法:收集瀘州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院脊柱外科2013年6月至2015年4月診斷明確并行手術(shù)治療的頸椎病患者軟骨終板及椎間盤85例,同期收集外傷致頸椎骨折(非寰樞椎骨折,術(shù)前無頸椎病癥狀與體征)并行手術(shù)治療的軟骨終板及椎間盤12例作為對(duì)照。將頸椎病患者按年齡分組,A組為20~29歲,B組30~39歲,C組40~49歲,D組50~59歲,E組60~70歲,F(xiàn)組為對(duì)照組年齡28~46
2、歲,每組包含4個(gè)病例。術(shù)前所有病例均行X線,核磁共振等常規(guī)檢查。術(shù)后觀察各組頸椎軟骨終板及椎間盤HE染色,根據(jù)Thompson椎間盤退變病理分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)其退變程度進(jìn)行分級(jí);Masson染色、透射電鏡照片觀察超微結(jié)構(gòu);Tunel免疫組化,觀察軟骨終板及椎間盤凋亡細(xì)胞。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示。組間差異比較采用單因素方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:HE染色A組,軟骨終板中陷窩細(xì)胞較多,亦可見清晰細(xì)
3、胞核,細(xì)胞周圍纖維結(jié)構(gòu)緊密,鏡下可見少量玻璃樣變性;椎間盤中可見少量細(xì)胞結(jié)構(gòu),纖維組織排列緊密,無斷裂現(xiàn)象。B組,軟骨終板中陷窩細(xì)胞數(shù)量明顯減少,細(xì)胞中仍可見細(xì)胞核等結(jié)構(gòu),細(xì)胞周圍纖維組織排列雜亂;椎間盤中細(xì)胞較少,纖維組織排列較疏松。C組,軟骨終板中陷窩細(xì)胞結(jié)構(gòu)欠清晰,部分細(xì)胞中未見細(xì)胞核,大量細(xì)胞水腫,細(xì)胞周圍可見大量的玻璃樣變性;椎間盤中纖維大量斷裂,膠原纖維變稀疏、雜亂。D組,軟骨終板陷窩細(xì)胞結(jié)構(gòu)欠清晰,大量細(xì)胞核消失,出現(xiàn)空泡
4、現(xiàn)象,細(xì)胞周圍結(jié)締組織大量玻璃樣變性;椎間盤可見大量斷裂的纖維,未見細(xì)胞。E組,軟骨終板中陷窩細(xì)胞明顯減少,細(xì)胞結(jié)構(gòu)不清晰,細(xì)胞周圍大量玻璃樣變性及粘液樣變性;椎間盤可見大量斷裂的膠原纖維,膠原纖維十分稀疏,軟骨終板內(nèi)甚至出現(xiàn)鈣化等一系列退變晚期的表現(xiàn)。而對(duì)照組(F組)軟骨終板中細(xì)胞數(shù)量較多,大部分胞核清晰可見,細(xì)胞周圍軟骨纖維排列緊密;椎間盤含大量緊密排列的膠原纖維,其中可見少量細(xì)胞,胞核清晰可見。Thompson分級(jí),各組椎間盤及軟
5、骨終板病理變化情況為A組Ⅰ級(jí)8個(gè),Ⅱ級(jí)2個(gè),Ⅲ級(jí)2個(gè),Ⅳ級(jí)0個(gè),Ⅴ級(jí)0個(gè)。B組Ⅰ級(jí)2個(gè),Ⅱ級(jí)4個(gè),Ⅲ級(jí)2個(gè),Ⅳ級(jí)4個(gè),Ⅴ級(jí)0個(gè)。C組Ⅰ級(jí)1個(gè),Ⅱ級(jí)4個(gè),Ⅲ級(jí)4個(gè),Ⅳ級(jí)3個(gè),Ⅴ級(jí)0個(gè)。D組Ⅰ級(jí)0個(gè),Ⅱ級(jí)1個(gè),Ⅲ級(jí)6個(gè),Ⅳ級(jí)5個(gè),Ⅴ級(jí)0個(gè)。E組Ⅰ級(jí)0個(gè),Ⅱ級(jí)1個(gè),Ⅲ級(jí)4個(gè),Ⅳ級(jí)7個(gè),Ⅴ級(jí)0個(gè)。F組Ⅰ級(jí)11個(gè),Ⅱ級(jí)1個(gè),Ⅲ級(jí)0個(gè),Ⅳ級(jí)0個(gè),Ⅴ級(jí)0個(gè)。Masson染色見實(shí)驗(yàn)組切片含有大量淡藍(lán)色均一染色結(jié)構(gòu),考慮為退變后的淀粉樣變,部分膠原纖維排
6、列紊亂松散;對(duì)照組Masson染色見較多深藍(lán)色纖維組織,排列緊密,未見淀粉樣變。掃描電鏡見頸椎病患者軟骨終板細(xì)胞存在不同程度的退變,隨著年齡增加呈現(xiàn)出退變程度遞增的趨勢(shì),部分細(xì)胞可見核變性、溶解,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量的脂質(zhì)、空泡甚至鈣化,細(xì)胞器消失,細(xì)胞功能不完整;細(xì)胞周圍軟骨囊結(jié)構(gòu)紊亂,軟骨囊壁厚度不一;纖維組織亦可見清晰的纖維結(jié)構(gòu)被大量玻璃樣變填充,周期性橫紋減少,結(jié)構(gòu)欠佳。對(duì)照組的軟骨終板細(xì)胞,其細(xì)胞核圓滑完整,細(xì)胞質(zhì)均勻,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線
7、粒體等細(xì)胞器清晰可見,細(xì)胞功能良好;細(xì)胞周圍軟骨囊結(jié)構(gòu)完整,軟骨囊壁厚度均勻;軟骨終板細(xì)胞外基質(zhì)豐富,膠原纖維密集,有明顯的周期性橫紋。Tunel免疫組化染色,計(jì)算凋亡率為:A組凋亡率21.5±2.55%,B組凋亡率42.1±2.57%,C組凋亡率47.5±4.68%,D組凋亡率67.4±4.52%,E組凋亡率78.6±4.91%;F組凋亡率15.2±3.12%。實(shí)驗(yàn)組凋亡率均不同程度高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且隨年
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