寬場熒光超分辨成像系統(tǒng)的研究.pdf

1、近年來熒光超分辨成像系統(tǒng)得到了很大發(fā)展，它能夠突破衍射極限的限制觀察到細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，并且不影響生物樣品的活性，因此使其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。本文介紹了一種新型的基于熒光漂白現(xiàn)象的超分辨顯微方法，并結(jié)合以下幾個方面:熒光的產(chǎn)生機(jī)理，熒光分子，單分子定位的基本原理，單分子定位算法以及熒光漂白現(xiàn)象，詳細(xì)的介紹了該方法的基本原理。該方法充分利用了熒光的隨機(jī)漂白性，通過對獲取的熒光漂白圖像進(jìn)行差分處理，獲得大量稀疏的熒光分子圖像，相

2、應(yīng)的熒光分子被一一區(qū)分并通過PSF數(shù)字化的方法計算出中心位置，從而重構(gòu)超分辨顯微圖像。
　　一般的在熒光顯微鏡中都是使用寬場照明，因?yàn)閷拡稣彰骶哂谐上褚晥龃螅瑫r間少等優(yōu)點(diǎn)，但是由于存在較大的背景噪聲，會影響最終的成像效果，因此論文提出了改進(jìn)方法，使用全內(nèi)反射熒光照明，利用全反射產(chǎn)生的倏逝波激發(fā)樣品，發(fā)出熒光，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該改進(jìn)方法能有效減少背景噪聲，提高圖像信噪比。
　　論文首先對該方法進(jìn)行了數(shù)值模擬，驗(yàn)證了該方法的可行性，