超分辨熒光壽命顯微方法及系統(tǒng).pdf

1、集成熒光強(qiáng)度成像以及熒光壽命成像的高分辨率熒光顯微系統(tǒng)在實(shí)際中有著非常重要的應(yīng)用，能在無(wú)損，無(wú)侵入的情況下，反映出被觀察樣品的微觀結(jié)構(gòu)信息以及環(huán)境條件信息，為生物細(xì)胞學(xué)、材料學(xué)等學(xué)科研究提供直觀途徑。本文提出在共聚焦顯微術(shù)的基礎(chǔ)上，利用受激輻射原理抑制邊緣熒光，使得實(shí)際熒光光斑尺寸低于衍射極限，實(shí)現(xiàn)超分辨顯微，并集成時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)技術(shù)(TCSPC)，同時(shí)獲得熒光壽命信息。
　　 本文首先介紹了目前主流的超分辨方法以及各自特點(diǎn)

2、，并就每種方法簡(jiǎn)述集成熒光壽命測(cè)量技術(shù)的可行性。
　　 然后詳細(xì)介紹了受激發(fā)射消耗超分辨顯微術(shù)的原理，并對(duì)用于壓縮熒光光斑尺寸的空心消耗光斑進(jìn)行相關(guān)仿真。同時(shí)介紹了幾種主要的熒光壽命測(cè)量手段，大致分析了超分辨熒光壽命成像系統(tǒng)的機(jī)理。
　　 為了驗(yàn)證熒光壽命顯微成像，首先搭建了共聚焦熒光壽命顯微系統(tǒng)，成功在衍射極限內(nèi)實(shí)現(xiàn)熒光壽命成像。隨后以共聚焦熒光壽命成像系統(tǒng)為基礎(chǔ)，引入相位調(diào)制消耗光束，最終實(shí)現(xiàn)超分辨熒光壽命顯微成像。